专利名称:一种EGFR抑制剂、其制备方法和在药学上的应用
专利类型:实用新型专利
专利申请号:CN202180047548.X
专利申请(专利权)人:上海和誉生物医药科技有限公司
权利人地址:上海市浦东新区自由贸易试验区哈雷路898弄3号
专利发明(设计)人:张鸣鸣,赵保卫,喻红平,陈椎,徐耀昌
专利摘要:涉及一种EGFR抑制剂、其制备方法和在药学上的应用。特别地涉及一种具有式(I)结构的EGFR抑制剂、其制备方法、含有其的药物组合物,以及其作为EGFR抑制剂的用途和其在制备治疗和/或预防至少部分与EGFR外显子20插入、缺失或其他突变相关的癌症、肿瘤或转移性疾病的药物中的用途,特别是在制备治疗和/或预防过度增殖性疾病和诱导细胞死亡障碍疾病的药物中的用途。其中式(I)的各取代基与说明书中的定义相同。#imgabs0#
主权利要求:
1.式(Ⅲ)化合物、其立体异构体或其药学上可接受盐:
其中,X为N;
Y2和Y4各自独立地为CR1或N;
每个R1各自独立地选自氢、氘、氟、氯、氰基、环丙基、环丁基、氧杂环丁基、C1‑4烷基、卤取代C1‑4烷基、羟基取代C1‑4烷基、氘取代C1‑4烷基、‑S(O)rR5、‑O‑R6、‑C(O)OR6、‑C(O)R7、‑NR8R9、‑P(O)R8R9和‑C(=NR8)R7;
R4a选自氢、氘、甲基、乙基、丙基、异丙基、环丙基、‑CHF2、‑CF3、‑CHD2和‑CD3;
R4b选自氢、氘和‑C(O)R7;
每个R5独立地选自氢、氘、羟基、C1‑4烷基、C3‑6环烷基、3‑6元杂环基、苯基、5‑6元杂芳基和‑NR8R9,上述基团独立地任选进一步被一个或多个选自氘、卤素、羟基、氧代、C1‑4烷基和C1‑4烷氧基的取代基所取代;
每个R6独立地选自氢、氘、C1‑4烷基、C3‑6环烷基、3‑6元杂环基、苯基和5‑6元杂芳基,上述基团独立地任选进一步被一个或多个选自氘、氟、氯、羟基、氧代、氰基、C1‑4烷基和C1‑4烷氧基的取代基所取代;
每个R7选自氢、氘、羟基、C1‑4烷基、C1‑4烷氧基、C2‑4链烯基、C3‑8环烷基、C3‑8环烷氧基、苯基和‑NR8R9,上述基团独立地任选进一步被一个或多个选自氘、氟、氯、羟基、氰基、C1‑4烷基和C1‑4烷氧基的取代基所取代;
每个R8和R9各自独立地选自氢、氘、羟基、C1‑4烷基、C3‑8环烷基、亚磺酰基、磺酰基、甲磺酰基、异丙磺酰基、环丙基磺酰基、对甲苯磺酰基、氨基磺酰基、二甲氨基磺酰基、氨基、单C1‑4烷基氨基、二C1‑4烷基氨基和C1‑4烷酰基;
或者,R8和R9与其直接相连的氮原子一起形成一个4‑8元杂环基,所述4‑8元杂环基任选进一步被一个或多个选自氘、氟、氯、羟基、C1‑4烷基、卤取代C1‑10烷基、氘取代C1‑10烷基、C1‑4烷氧基、C3‑8环烷基、苯基、氨基、单C1‑4烷基氨基、二C1‑4烷基氨基和C1‑4烷酰基的取代基所取代;且每个r各自独立地为0、1或2。
2.根据权利要求1所述的式(Ⅲ)化合物、其立体异构体或其药学上可接受盐,其特征在于,选自如下化合物:
3.一种根据权利要求1所述的式(Ⅲ)化合物、其立体异构体或其药学上可接受盐的制备方法,其特征在于,包括如下步骤:其中,X、Y2、Y4、R1、R4a和R4b如权利要求1中所定义。
4.一种药物组合物,其包含根据权利要求1‑2中任一项所述的式(Ⅲ)化合物、其立体异构体或其药学上可接受盐及可药用的载体。
5.根据权利要求1‑2中任一项所述的式(Ⅲ)化合物、其立体异构体或其药学上可接受盐在制备治疗和/或预防至少部分与EGFR外显子20插入、缺失或其他突变相关的癌症、肿瘤或转移性疾病的药物中的用途。
6.根据权利要求1‑2中任一项所述的式(Ⅲ)化合物、其立体异构体或其药学上可接受盐在制备预防和/或治疗与EGFR外显子20插入、缺失或其他突变相关的肺癌、胰腺癌、白血病、骨髓增生异常综合症、恶性淋巴瘤、头颈部肿瘤、胸腔肿瘤、胃肠道肿瘤、内分泌肿瘤、乳腺和其他妇科肿瘤、泌尿科肿瘤、皮肤肿瘤、肉瘤、鼻腔鼻窦内翻性乳头状瘤或鼻腔鼻窦内翻性乳头状瘤相关的鼻腔鼻窦鳞状细胞癌的药物中的用途。
7.根据权利要求6所述的用途,其特征在于,所述肺癌为非小细胞肺癌;所述胃肠道肿瘤为结肠癌或胃癌;所述头颈部肿瘤为头颈癌;所述乳腺和其他妇科肿瘤为乳腺癌,卵巢癌或子宫癌。 说明书 : 一种EGFR抑制剂、其制备方法和在药学上的应用技术领域[0001] 本发明属于药物合成领域,具体涉及一种EGFR抑制剂、其制备方法和在药学上的应用。背景技术[0002] 肺癌是全世界癌症死亡的主要原因,其中非小细胞肺癌(NSCLC)占85%。针对表皮生长因子受体(EGFR)突变、间变性淋巴瘤激酶(ALK)易位、ROS1原癌基因受体酪氨酸激酶(ROS1)重排和B‑raf原癌基因、丝氨酸/苏氨酸激酶(BRAF)的多靶点治疗已经成功开发并在临床上得到验证。针对EGFR的抑制剂能显著提高NSCLC中腺癌的无进展生存期,而其获得性耐药突变能够被第三代EGFR抑制剂所靶向。[0003] 尽管经典的EGFR激活突变(外显子19和21)和耐药突变(T790M)能够被现有的药物所抑制,但外显子20(Exon20)的插入突变也导致了EGFR信号的结构性激活,并且对现有的EGFR抑制剂都不敏感。外显子20突变是异质性的,包括1‑7个氨基酸在EGFR蛋白的762‑774位氨基酸之间的插入或重复。在NSCLC中,EGFR外显子20的突变频率占EGFR所有突变的4‑10%。这些突变与其他已知的致癌基因驱动突变相互排斥,并且在女性、非吸烟者、亚洲人群和非小细胞肺癌患者的腺癌中富集。除NSCLC外,EGFR外显子20插入突变还见于一种罕见的头颈部癌,即鼻腔鳞状细胞癌(SNSCC)。此外,在EGFR家族的另一成员HER2中也发现了结构类似的外显子20插入突变。[0004] 多个回顾性分析研究表明,目前可用的第1代、第2代和第3代EGFR抑制剂对外显子20插入突变的疗效有限,但A763‑Y764insFQEA突变除外。不可逆抑制剂波齐替尼(Poziotinib)和EGFR/MET双特异性抗体Amivantamab正在临床试验中。几种小分子抑制剂包括TAK‑788和TAS‑6417,在EGFR外显子20非小细胞肺癌患者中显示出临床上有意义的功效。但是,由于它们对EGFR野生型的选择性有限,在临床使用中的不良反应是不可避免的,并可能导致剂量限制性毒性。同时,临床上显示现有化合物可能存在暴露量不足的问题。因此,对于这些患者而言,迫切需要针对EGFR外显子20插入突变具有更高暴露量和/或高选择性的小分子抑制剂。发明内容[0005] 本发明的目的在于提供一种EGFR抑制剂、其制备方法和在药学上的应用,本发明系列化合物对EGFR外显子20插入、缺失或其他突变细胞学活性具有很强的抑制作用,并对EGFR野生型具有高选择性,可广泛应用于制备治疗和/或预防至少部分与EGFR外显子20插入、缺失或其他突变相关的癌症、肿瘤或转移性疾病的药物,特别是治疗过度增殖性疾病和诱导细胞死亡障碍疾病的药物,从而有望开发出新一代EGFR抑制剂。[0006] 本发明第一方面提供一种式(I)化合物、其立体异构体、前药或其药学上可接受盐:[0007][0008] 其中,[0009] X为CH或N;[0010] Y1、Y2、Y3和Y4各自独立地为CR1或N;[0011] R1选自氢、氘、羟基、卤素、氰基、硝基、叠氮基、C1‑10烷基、C2‑10链烯基、C2‑10链炔基、卤取代C1‑10烷基、羟基取代C1‑10烷基、氘取代C1‑10烷基、C3‑12环烷基、3‑12元杂环基、C6‑10芳基、5‑10元杂芳基、‑SF5、‑S(O)rR5、‑O‑R6、‑C(O)OR6、‑C(O)R7、‑O‑C(O)R7、‑NR8R9、‑P(O)R8R9、‑C(=NR8)R7、‑N(R8)‑C(=NR9)R7、‑C(O)NR8R9和‑N(R8)‑C(O)R7;[0012] R2和R3各自独立地选自氢、氘、卤素、氰基、硝基、叠氮基、C1‑10烷基、C2‑10链烯基、C2‑10链炔基、C3‑12环烷基、3‑12元杂环基、C6‑10芳基、5‑10元杂芳基、‑SF5、‑S(O)rR5、‑O‑R6、‑C(O)OR6、‑C(O)R7、‑O‑C(O)R7、‑NR8R9、‑P(O)R8R9、‑C(=NR8)R7、‑N(R8)‑C(=NR9)R7、‑C(O)NR8R9和‑N(R8)‑C(O)R7,上述基团独立地任选进一步被一个或多个选自氘、卤素、氰基、硝基、叠氮基、C1‑10烷基、C2‑10链烯基、C2‑10链炔基、卤取代C1‑10烷基、氘取代C1‑10烷基、C3‑12环烷基、3‑12元杂环基、C6‑10芳基、5‑10元杂芳基、=O、‑SF5、‑S(O)rR5、‑O‑R6、‑C(O)OR6、‑C(O)R7、‑O‑C(O)R7、‑NR8R9、‑C(=NR8)R7、‑N(R8)‑C(=NR9)R7、‑C(O)NR8R9和‑N(R8)‑C(O)R7的取代基所取代;[0013] R4a和R4b各自独立地选自氢、氘、羟基、C1‑10烷基、卤取代C1‑10烷基、氘取代C1‑10烷基、C3‑12环烷基、3‑12元杂环基、‑C(O)OR6、‑C(O)R7和‑C(O)NR8R9;[0014] 每个R5独立地选自氢、氘、羟基、C1‑10烷基、C2‑10链烯基、C3‑12环烷基、3‑12元杂环基、C6‑10芳基、5‑10元杂芳基和‑NR8R9,上述基团独立地任选进一步被一个或多个选自氘、卤素、羟基、氧代、C1‑10烷基、C1‑10烷氧基、C3‑12环烷基、C3‑12环烷氧基、3‑12元杂环基、3‑12元杂环氧基、C6‑10芳基、C6‑10芳氧基、5‑10元杂芳基、5‑10元杂芳氧基和‑NR8R9的取代基所取代;[0015] 每个R6独立地选自氢、氘、C1‑10烷基、C2‑10链烯基、C3‑12环烷基、3‑12元杂环基、C6‑10芳基和5‑10元杂芳基,上述基团独立地任选进一步被一个或多个选自氘、卤素、羟基、氧代、氰基、C1‑10烷基、C1‑10烷氧基、C3‑12环烷基、C3‑12环烷氧基、3‑12元杂环基、3‑12元杂环氧基、C6‑10芳基、C6‑10芳氧基、5‑10元杂芳基、5‑10元杂芳氧基和‑NR8R9的取代基所取代;[0016] 每个R7选自氢、氘、羟基、C1‑10烷基、C1‑10烷氧基、C2‑10链烯基、C2‑10链炔基、C3‑12环烷基、C3‑12环烷氧基、3‑12元杂环基、3‑12元杂环氧基、C6‑10芳基、C6‑10芳氧基、5‑10元杂芳基、5‑10元杂芳氧基和‑NR8R9,上述基团独立地任选进一步被一个或多个选自氘、卤素、羟基、氰基、C1‑10烷基、C1‑10烷氧基、C3‑12环烷基、C3‑12环烷氧基、3‑12元杂环基、3‑12元杂环氧基、C6‑10芳基、C6‑10芳氧基、5‑10元杂芳基、5‑10元杂芳氧基和‑NR8R9的取代基所取代;[0017] 每个R8和R9各自独立地选自氢、氘、羟基、C1‑10烷基、C2‑10链烯基、C2‑10链炔基、C3‑12环烷基、3‑12元杂环基、C6‑10芳基、5‑10元杂芳基、亚磺酰基、磺酰基、甲磺酰基、异丙磺酰基、环丙基磺酰基、对甲苯磺酰基、氨基磺酰基、二甲氨基磺酰基、氨基、单C1‑10烷基氨基、二C1‑10烷基氨基和C1‑10烷酰基,上述基团独立地任选进一步被一个或多个选自氘、卤素、羟基、C1‑10烷基、C2‑10链烯基、C2‑10链炔基、卤取代C1‑10烷基、氘取代C1‑10烷基、C1‑10烷氧基、C3‑12环烷基、C3‑12环烷氧基、3‑12元杂环基、3‑12元杂环氧基、C6‑10芳基、C6‑10芳氧基、5‑10元杂芳基、5‑10元杂芳氧基、氨基、单C1‑10烷基氨基、二C1‑10烷基氨基和C1‑10烷酰基的取代基所取代;[0018] 或者,R8和R9与其直接相连的氮原子一起形成一个4‑10元杂环基或4‑10元杂芳基,所述4‑10元杂环基或4‑10元杂芳基任选进一步被一个或多个选自氘、卤素、羟基、C1‑10烷基、C2‑10链烯基、C2‑10链炔基、卤取代C1‑10烷基、氘取代C1‑10烷基、C1‑10烷氧基、C3‑12环烷基、C3‑12环烷氧基、3‑12元杂环基、3‑12元杂环氧基、C6‑10芳基、C6‑10芳氧基、5‑10元杂芳基、5‑10元杂芳氧基、氨基、单C1‑10烷基氨基、二C1‑10烷基氨基和C1‑10烷酰基的取代基所取代;[0019] n为0、1、2、3或4;且[0020] 每个r各自独立地为0、1或2。[0021] 作为优选的方案,在所述式(I)化合物、其立体异构体、前药或其药学上可接受盐中,R2和R3各自独立地选自氢、氘、卤素、氰基、硝基、叠氮基、C1‑4烷基、卤取代C1‑4烷基、氘取代C1‑4烷基、C2‑4链烯基、C2‑4链炔基、C3‑8环烷基、3‑8元杂环基、C6‑8芳基、5‑8元杂芳基、‑SF5、‑S(O)rR5、‑O‑R6、‑C(O)OR6、‑C(O)R7、‑O‑C(O)R7、‑NR8R9、‑P(O)R8R9、‑C(=NR8)R7、‑N(R8)‑C(=NR9)R7、‑C(O)NR8R9和‑N(R8)‑C(O)R7;[0022] 其中,R5、R6、R7、R8、R9和r如式(I)化合物所述。[0023] 作为优选的方案,在所述式(I)化合物、其立体异构体、前药或其药学上可接受盐中,R1选自氢、氘、羟基、卤素、氰基、C1‑4烷基、卤取代C1‑4烷基、羟基取代C1‑4烷基、氘取代C1‑4烷基、C3‑8环烷基、3‑8元杂环基、苯基、‑S(O)rR5、‑O‑R6、‑C(O)OR6、‑C(O)R7、‑NR8R9、‑P(O)R8R9、‑C(=NR8)R7、‑C(O)NR8R9和‑N(R8)‑C(O)R7;[0024] 其中,R5、R6、R7、R8、R9和r如式(I)化合物所述。[0025] 作为优选的方案,在所述式(I)化合物、其立体异构体、前药或其药学上可接受盐中,每个R5独立地选自氢、氘、羟基、C1‑4烷基、C2‑4链烯基、C3‑8环烷基、3‑8元杂环基、C6‑8芳基、5‑8元杂芳基和‑NR8R9,上述基团独立地任选进一步被一个或多个选自氘、卤素、羟基、氧代、C1‑4烷基、C1‑4烷氧基、C3‑8环烷基、C3‑8环烷氧基、3‑8元杂环基、3‑8元杂环氧基、C6‑8芳基、C6‑10芳氧基、5‑8元杂芳基、5‑8元杂芳氧基和‑NR8R9的取代基所取代;[0026] 每个R6独立地选自氢、氘、C1‑4烷基、C2‑4链烯基、C3‑8环烷基、3‑8元杂环基、C6‑8芳基和5‑8元杂芳基,上述基团独立地任选进一步被一个或多个选自氘、卤素、羟基、氧代、氰基、C1‑4烷基、C1‑4烷氧基、C3‑8环烷基、C3‑8环烷氧基、3‑8元杂环基、3‑8元杂环氧基、C6‑8芳基、C6‑8芳氧基、5‑8元杂芳基、5‑8元杂芳氧基和‑NR8R9的取代基所取代;[0027] 每个R7选自氢、氘、羟基、C1‑4烷基、C1‑4烷氧基、C2‑4链烯基、C2‑4链炔基、C3‑8环烷基、C3‑8环烷氧基、3‑8元杂环基、3‑8元杂环氧基、C6‑8芳基、C6‑8芳氧基、5‑8元杂芳基、5‑8元杂芳氧基和‑NR8R9,上述基团独立地任选进一步被一个或多个选自氘、卤素、羟基、氰基、C1‑4烷基、C1‑4烷氧基、C3‑8环烷基、C3‑8环烷氧基、3‑8元杂环基、3‑8元杂环氧基、C6‑8芳基、C6‑8芳氧基、5‑8元杂芳基、5‑8元杂芳氧基和‑NR8R9的取代基所取代;[0028] 每个R8和R9各自独立地选自氢、氘、羟基、C1‑4烷基、C2‑4链烯基、C2‑4链炔基、C3‑8环烷基、3‑8元杂环基、C6‑8芳基、5‑8元杂芳基、亚磺酰基、磺酰基、甲磺酰基、异丙磺酰基、环丙基磺酰基、对甲苯磺酰基、氨基磺酰基、二甲氨基磺酰基、氨基、单C1‑4烷基氨基、二C1‑4烷基氨基和C1‑4烷酰基,上述基团独立地任选进一步被一个或多个选自氘、卤素、羟基、C1‑4烷基、卤取代C1‑4烷基、氘取代C1‑4烷基、C1‑4烷氧基、C3‑8环烷基、C3‑8环烷氧基、3‑8元杂环基、3‑8元杂环氧基、C6‑8芳基、C6‑8芳氧基、5‑8元杂芳基、5‑8元杂芳氧基、氨基、单C1‑4烷基氨基、二C1‑4烷基氨基和C1‑4烷酰基的取代基所取代;[0029] 或者,R8和R9与其直接相连的氮原子一起形成一个4‑8元杂环基,所述4‑8元杂环基任选进一步被一个或多个选自氘、卤素、羟基、C1‑4烷基、卤取代C1‑10烷基、氘取代C1‑10烷基、C1‑4烷氧基、C3‑8环烷基、C3‑8环烷氧基、3‑8元杂环基、3‑8元杂环氧基、C6‑8芳基、C6‑8芳氧基、5‑8元杂芳基、5‑8元杂芳氧基、氨基、单C1‑4烷基氨基、二C1‑4烷基氨基和C1‑4烷酰基的取代基所取代。[0030] 作为进一步优选的方案,所述式(I)化合物、其立体异构体、前药或其药学上可接受盐中,式(I)化合物为如下式(II)化合物:[0031][0032] 其中,[0033] X为CH或N;[0034] Y1、Y2、Y3和Y4各自独立地为CR1或N;[0035] R1选自氢、氘、羟基、卤素、氰基、C1‑4烷基、卤取代C1‑4烷基、羟基取代C1‑4烷基、氘取代C1‑4烷基、C3‑8环烷基、3‑8元杂环基、苯基、‑S(O)rR5、‑O‑R6、‑C(O)OR6、‑C(O)R7、‑NR8R9、‑P(O)R8R9、‑C(=NR8)R7、‑C(O)NR8R9和‑N(R8)‑C(O)R7;[0036] 每个R3各自独立地选自氢、氘、卤素、氰基、硝基、叠氮基、C1‑4烷基、卤取代C1‑4烷基、氘取代C1‑4烷基、C2‑4链烯基、C2‑4链炔基、C3‑8环烷基、3‑8元杂环基、C6‑8芳基、5‑8元杂芳基、‑SF5、‑S(O)rR5、‑O‑R6、‑C(O)OR6、‑C(O)R7、‑O‑C(O)R7、‑NR8R9、‑P(O)R8R9、‑C(=NR8)R7、‑N(R8)‑C(=NR9)R7、‑C(O)NR8R9和‑N(R8)‑C(O)R7;[0037] R4a和R4b各自独立地选自氢、氘、羟基、C1‑4烷基、卤取代C1‑4烷基、氘取代C1‑4烷基、C3‑6环烷基、3‑6元杂环基和‑C(O)R7;[0038] 每个R5独立地选自氢、氘、羟基、C1‑4烷基、C2‑4链烯基、C3‑8环烷基、3‑8元杂环基、C6‑8芳基、5‑8元杂芳基和‑NR8R9,上述基团独立地任选进一步被一个或多个选自氘、卤素、羟基、氧代、C1‑4烷基、C1‑4烷氧基、C3‑8环烷基、C3‑8环烷氧基、3‑8元杂环基、3‑8元杂环氧基、C6‑8芳基、C6‑8芳氧基、5‑8元杂芳基、5‑8元杂芳氧基和‑NR8R9的取代基所取代;[0039] 每个R6独立地选自氢、氘、C1‑4烷基、C2‑4链烯基、C3‑8环烷基、3‑8元杂环基、C6‑8芳基和5‑8元杂芳基,上述基团独立地任选进一步被一个或多个选自氘、卤素、羟基、氧代、氰基、C1‑4烷基、C1‑4烷氧基、C3‑8环烷基、C3‑8环烷氧基、3‑8元杂环基、3‑8元杂环氧基、C6‑8芳基、C6‑8芳氧基、5‑8元杂芳基、5‑8元杂芳氧基和‑NR8R9的取代基所取代;[0040] 每个R7选自氢、氘、羟基、C1‑4烷基、C1‑4烷氧基、C2‑4链烯基、C2‑4链炔基、C3‑8环烷基、C3‑8环烷氧基、3‑8元杂环基、3‑8元杂环氧基、C6‑8芳基、C6‑8芳氧基、5‑8元杂芳基、5‑8元杂芳氧基和‑NR8R9,上述基团独立地任选进一步被一个或多个选自氘、卤素、羟基、氰基、C1‑4烷基、C1‑4烷氧基、C3‑8环烷基、C3‑8环烷氧基、3‑8元杂环基、3‑8元杂环氧基、C6‑8芳基、C6‑8芳氧基、5‑8元杂芳基、5‑8元杂芳氧基和‑NR8R9的取代基所取代;[0041] 每个R8和R9各自独立地选自氢、氘、羟基、C1‑4烷基、C2‑4链烯基、C2‑4链炔基、C3‑8环烷基、3‑8元杂环基、C6‑8芳基、5‑8元杂芳基、亚磺酰基、磺酰基、甲磺酰基、异丙磺酰基、环丙基磺酰基、对甲苯磺酰基、氨基磺酰基、二甲氨基磺酰基、氨基、单C1‑4烷基氨基、二C1‑4烷基氨基和C1‑4烷酰基,上述基团独立地任选进一步被一个或多个选自氘、卤素、羟基、C1‑4烷基、卤取代C1‑4烷基、氘取代C1‑4烷基、C1‑4烷氧基、C3‑8环烷基、C3‑8环烷氧基、3‑8元杂环基、3‑8元杂环氧基、C6‑8芳基、C6‑8芳氧基、5‑8元杂芳基、5‑8元杂芳氧基、氨基、单C1‑4烷基氨基、二C1‑4烷基氨基和C1‑4烷酰基的取代基所取代;[0042] 或者,R8和R9与其直接相连的氮原子一起形成一个4‑8元杂环基,所述4‑8元杂环基任选进一步被一个或多个选自氘、卤素、羟基、C1‑4烷基、卤取代C1‑10烷基、氘取代C1‑10烷基、C1‑4烷氧基、C3‑8环烷基、C3‑8环烷氧基、3‑8元杂环基、3‑8元杂环氧基、C6‑8芳基、C6‑8芳氧基、5‑8元杂芳基、5‑8元杂芳氧基、氨基、单C1‑4烷基氨基、二C1‑4烷基氨基和C1‑4烷酰基的取代基所取代;[0043] n为0、1、2、3或4;且[0044] 每个r各自独立地为0、1或2。[0045] 作为更进一步优选的方案,所述式(I)化合物、其立体异构体、前药或其药学上可接受盐中,式(I)化合物为如下式(III)化合物:[0046][0047] 其中,[0048] X为CH或N;[0049] Y2和Y4各自独立地为CR1或N;[0050] 每个R1各自独立地选自氢、氘、卤素、氰基、C1‑4烷基、卤取代C1‑4烷基、羟基取代C1‑4烷基、氘取代C1‑4烷基、C3‑6环烷基、3‑6元杂环基、苯基、‑S(O)rR5、‑O‑R6、‑C(O)OR6、‑C(O)R7、‑NR8R9、‑P(O)R8R9和‑C(=NR8)R7;[0051] R4a和R4b各自独立地选自氢、氘、C1‑4烷基、卤取代C1‑4烷基、氘取代C1‑4烷基、C3‑6环烷基和‑C(O)R7;[0052] 其中,R5、R6、R7、R8、R9和r如式(I)化合物所述。[0053] 作为再更进一步优选的方案,所述式(I)化合物、其立体异构体、前药或其药学上可接受盐中,R4a和R4b各自独立地选自氢、氘、甲基、乙基、丙基、异丙基、环丙基、‑CHF2、‑CF3、‑CHD2、‑CD3和‑C(O)R7;其中,R7如式(I)化合物所述;[0054] 优选地,R4a选自氢、氘、甲基、乙基、丙基、异丙基、环丙基、‑CHF2、‑CF3、‑CHD2和‑CD3;R4b选自氢、氘和‑C(O)R7;其中,R7如式(I)化合物所述。[0055] 作为再更进一步优选的方案,所述式(I)化合物、其立体异构体、前药或其药学上可接受盐中,每个R1各自独立地选自氢、氘、氟、氯、氰基、环丙基、环丁基、氧杂环丁基、C1‑4烷基、卤取代C1‑4烷基、羟基取代C1‑4烷基、氘取代C1‑4烷基、‑S(O)rR5、‑O‑R6、‑C(O)OR6、‑C(O)R7、‑NR8R9、‑P(O)R8R9和‑C(=NR8)R7;[0056] 其中,R5、R6、R7、R8、R9和r如式(I)化合物所述。[0057] 作为优选的方案,在所述式(I)化合物、其立体异构体、前药或其药学上可接受盐中,每个R5独立地选自氢、氘、羟基、C1‑4烷基、C3‑6环烷基、3‑6元杂环基、苯基、5‑6元杂芳基和‑NR8R9,上述基团独立地任选进一步被一个或多个选自氘、卤素、羟基、氧代、C1‑4烷基和C1‑4烷氧基的取代基所取代;[0058] 每个R6独立地选自氢、氘、C1‑4烷基、C3‑6环烷基、3‑6元杂环基、苯基和5‑6元杂芳基,上述基团独立地任选进一步被一个或多个选自氘、氟、氯、羟基、氧代、氰基、C1‑4烷基和C1‑4烷氧基的取代基所取代;[0059] 每个R7选自氢、氘、羟基、C1‑4烷基、C1‑4烷氧基、C2‑4链烯基、C3‑8环烷基、C3‑8环烷氧基、苯基和‑NR8R9,上述基团独立地任选进一步被一个或多个选自氘、氟、氯、羟基、氰基、C1‑4烷基和C1‑4烷氧基的取代基所取代;[0060] 每个R8和R9各自独立地选自氢、氘、羟基、C1‑4烷基、C3‑8环烷基、亚磺酰基、磺酰基、甲磺酰基、异丙磺酰基、环丙基磺酰基、对甲苯磺酰基、氨基磺酰基、二甲氨基磺酰基、氨基、单C1‑4烷基氨基、二C1‑4烷基氨基和C1‑4烷酰基;[0061] 或者,R8和R9与其直接相连的氮原子一起形成一个4‑8元杂环基,所述4‑8元杂环基任选进一步被一个或多个选自氘、氟、氯、羟基、C1‑4烷基、卤取代C1‑10烷基、氘取代C1‑10烷基、C1‑4烷氧基、C3‑8环烷基、苯基、氨基、单C1‑4烷基氨基、二C1‑4烷基氨基和C1‑4烷酰基的取代基所取代。[0062] 作为最优选的方案,所述式(I)化合物、其立体异构体、前药或其药学上可接受盐包括但不限于如下化合物:[0063][0064][0065][0066] 本发明第二方面提供式(I)化合物、其立体异构体、前药或其药学上可接受盐的制备方法,包括如下步骤:[0067][0068] 其中,X、Y1、Y2、Y3、Y4、R2、R3、R4a、R4b和n如式(I)化合物所述。[0069] 本发明第三方面提供一种药物组合物,其包括式(I)化合物、其立体异构体、前药或其药学上可接受盐及可药用的载体。[0070] 本发明还涉及所述式(I)化合物、其立体异构体、前药或其药学上可接受盐在制备治疗和/或预防至少部分与EGFR外显子20插入、缺失或其他突变相关的癌症、肿瘤或转移性疾病的药物中的用途。[0071] 本发明还涉及式(I)化合物、其立体异构体、前药或其药学上可接受盐在制备预防和/或治疗由过度增殖和诱导细胞死亡障碍引起的肿瘤、癌症和或转移性疾病的药物中的用途。本发明还涉及前述式(I)化合物、其立体异构体、前药或其药学上可接受盐在制备预防和/或治疗至少部分与EGFR外显子20插入、缺失或其他突变相关肺癌、结肠癌、胰腺癌、头颈癌、乳腺癌,卵巢癌,子宫癌、胃癌、非小细胞肺癌、白血病、骨髓增生异常综合症、恶性淋巴瘤、头颈部肿瘤、胸腔肿瘤、胃肠道肿瘤、内分泌肿瘤、乳腺和其他妇科肿瘤、泌尿科肿瘤、皮肤肿瘤、肉瘤、鼻腔鼻窦内翻性乳头状瘤或鼻腔鼻窦内翻性乳头状瘤相关的鼻腔鼻窦鳞状细胞癌药物中的用途。[0072] 本发明还涉及所述式(I)化合物、其立体异构体、前药或其药学上可接受盐,其用于治疗和/或预防至少部分与EGFR外显子20插入、缺失或其他突变相关的癌症、肿瘤或转移性疾病的用途。[0073] 本发明还涉及所述式(I)化合物、其立体异构体、前药或其药学上可接受盐,其用于预防和/或治疗由过度增殖和诱导细胞死亡障碍引起的肿瘤、癌症和或转移性疾病的用途。[0074] 本发明还涉及所述式(I)化合物、其立体异构体、前药或其药学上可接受盐,其用于治疗和/或预防至少部分与EGFR外显子20插入、缺失或其他突变相关肺癌、结肠癌、胰腺癌、头颈癌、乳腺癌,卵巢癌,子宫癌、胃癌、非小细胞肺癌、白血病、骨髓增生异常综合症、恶性淋巴瘤、头颈部肿瘤、胸腔肿瘤、胃肠道肿瘤、内分泌肿瘤、乳腺和其他妇科肿瘤、泌尿科肿瘤、皮肤肿瘤、肉瘤、鼻腔鼻窦内翻性乳头状瘤或鼻腔鼻窦内翻性乳头状瘤相关的鼻腔鼻窦鳞状细胞癌的用途。[0075] 本发明还涉及一种治疗和/或预防至少部分与EGFR外显子20插入、缺失或其他突变相关的癌症、肿瘤或转移性疾病的方法,其包括向所需患者施用治疗有效量的所述式(I)化合物、其立体异构体、前药或其药学上可接受盐。[0076] 本发明还涉及一种预防和/或治疗由过度增殖和诱导细胞死亡障碍引起的肿瘤、癌症和或转移性疾病的方法,其包括向所需患者施用治疗有效量的所述式(I)化合物、其立体异构体、前药或其药学上可接受盐。[0077] 本发明还涉及一种治疗和/或预防至少部分与EGFR外显子20插入、缺失或其他突变相关肺癌、结肠癌、胰腺癌、头颈癌、乳腺癌,卵巢癌,子宫癌、胃癌、非小细胞肺癌、白血病、骨髓增生异常综合症、恶性淋巴瘤、头颈部肿瘤、胸腔肿瘤、胃肠道肿瘤、内分泌肿瘤、乳腺和其他妇科肿瘤、泌尿科肿瘤、皮肤肿瘤、肉瘤、鼻腔鼻窦内翻性乳头状瘤或鼻腔鼻窦内翻性乳头状瘤相关的鼻腔鼻窦鳞状细胞癌的方法,其包括向所需患者施用治疗有效量的所述式(I)化合物、其立体异构体、前药或其药学上可接受盐。具体实施方式[0078] 本申请的发明人经过广泛而深入地研究,首次研发出首次研发出一种具有如下式(I)结构的EGFR抑制剂,本发明系列化合物可广泛应用于制备治疗和/或预防至少部分与EGFR外显子20插入、缺失或其他突变相关的癌症、肿瘤或转移性疾病的药物,特别是治疗过度增殖性疾病和诱导细胞死亡障碍疾病的药物,有望开发成新一代EGFR抑制剂。在此基础上,完成了本发明。[0079] 详细说明:除非有相反陈述或特别说明,下列用在说明书和权利要求书中的术语具有下述含义。[0080] “烷基”指直链或含支链的饱和脂族烃基团,优选包括1至10个或1至6个碳原子或1至4个碳原子的直链烷基和含支链烷基,包括但不限于甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、叔丁基、仲丁基、正戊基、1,1‑二甲基丙基、1,2‑二甲基丙基、2,2‑二甲基丙基、1‑乙基丙基、2‑甲基丁基、3‑甲基丁基、正己基、1‑乙基‑2‑甲基丙基、1,1,2‑三甲基丙基、1,1‑二甲基丁基、1,2‑二甲基丁基、2,2‑二甲基丁基、1,3‑二甲基丁基、2‑乙基丁基、2‑甲基戊基、3‑甲基戊基、4‑甲基戊基、2,3‑二甲基丁基、正庚基、2‑甲基己基、3‑甲基己基、4‑甲基己基、5‑甲基己基、2,3‑二甲基戊基、2,4‑二甲基戊基、2,2‑二甲基戊基、3,3‑二甲基戊基、2‑乙基戊基、3‑乙基戊基、正辛基、2,3‑二甲基己基、2,4‑二甲基己基、2,5‑二甲基己基、2,2‑二甲基己基、3,3‑二甲基己基、4,4‑二甲基己基、2‑乙基己基、3‑乙基己基、4‑乙基己基、2‑甲基‑2‑乙基戊基、2‑甲基‑3‑乙基戊基或其各种支链异构体等。“C1‑10烷基”指包括1至10个碳原子的直链烷基和含支链烷基,“C1‑4烷基”指包括1至4个碳原子的直链烷基和含支链烷基。[0081] 烷基可以是任选取代的或未取代的,当被取代时,取代基优选为一个或多个(优选1、2、3或4个)以下基团,独立地选自氘、卤素、氰基、硝基、叠氮基、C1‑10烷基、C2‑10链烯基、C2‑10链炔基、卤取代C1‑10烷基、氘取代C1‑10烷基、C3‑12环烷基、3‑12元杂环基、C6‑10芳基、5‑10元杂芳基、=O、‑SF5、‑S(O)rR5、‑O‑R6、‑C(O)OR6、‑C(O)R7、‑O‑C(O)R7、‑NR8R9、‑P(O)R8R9、‑C(=NR8)R7、‑N(R8)‑C(=NR9)R7、‑C(O)NR8R9和‑N(R8)‑C(O)R7的取代基所取代。[0082] “环烷基”或“碳环”指饱和或部分不饱和单环或多环环状烃取代基,所述部分不饱和环状烃是指环状烃可以含有一个或多个(优选1、2或3个)双键,但没有一个环具有完全共轭的π电子系统,环烷基分为单环环烷基、多环环烷基,优选包括3至12个或3至8个或3至6个碳原子的环烷基,例如,“C3‑12环烷基”指包括3至12个碳原子的环烷基,“C3‑8环烷基”指包括3至8个碳原子的环烷基,“C3‑6环烷基”指包括3至6个碳原子的环烷基,其中:[0083] 单环环烷基包括但不限于环丙基、环丁基、环戊基、环戊烯基、环己基、环己烯基、环己二烯基、环庚基、环庚三烯基、环辛基等。[0084] 多环环烷基包括螺环、稠环和桥环的环烷基。“螺环烷基”指单环之间共用一个碳原子(称螺原子)的多环基团,这些可以含有一个或多个(优选1、2或3个)双键,但没有一个环具有完全共轭的π电子系统。根据环与环之间共用螺原子的数目将螺环烷基分为单螺环烷基、双螺环烷基或多螺环烷基,螺环烷基包括但不限于:[0085][0086] “稠环烷基”指系统中的每个环与体系中的其他环共享毗邻的一对碳原子的全碳多环基团,其中一个或多个环可以含有一个或多个(优选1、2或3个)双键,但没有一个环具有完全共轭的π电子系统。根据组成环的数目可以分为双环、三环、四环或多环稠环烷基,稠环烷基包括但不限于:[0087][0088] “桥环烷基”指任意两个环共用两个不直接连接的碳原子的全碳多环基团,这些可以含有一个或多个(优选1、2或3个)双键,但没有一个环具有完全共轭的π电子系统。根据组成环的数目可以分为双环、三环、四环或多环桥环烷基,桥环烷基包括但不限于:[0089][0090] 所述环烷基环可以稠合于芳基、杂芳基或杂环烷基环上,其中与母体结构连接在一起的环为环烷基,包括但不限于茚满基、四氢萘基、苯并环庚烷基等。[0091] 环烷基可以是任选取代的或未取代的,当被取代时,取代基优选为一个或多个(优选1、2、3或4个)以下基团,独立地选自氘、卤素、氰基、硝基、叠氮基、C1‑10烷基、C2‑10链烯基、C2‑10链炔基、卤取代C1‑10烷基、氘取代C1‑10烷基、C3‑12环烷基、3‑12元杂环基、C6‑10芳基、5‑10元杂芳基、=O、‑SF5、‑S(O)rR5、‑O‑R6、‑C(O)OR6、‑C(O)R7、‑O‑C(O)R7、‑NR8R9、‑P(O)R8R9、‑C(=NR8)R7、‑N(R8)‑C(=NR9)R7、‑C(O)NR8R9和‑N(R8)‑C(O)R7的取代基所取代。[0092] “杂环基”或“杂环”指饱和或部分不饱和单环或多环环状烃取代基,所述部分不饱和环状烃是指环状烃可以含有一个或多个(优选1、2或3个)双键,但没有一个环具有完全共轭的π电子系统,杂环基其中一个或多个(优选1、2、3或4个)环原子选自氮、氧或S(O)r(其中r是整数0、1、2)的杂原子,但不包括‑O‑O‑、‑O‑S‑或‑S‑S‑的环部分,其余环原子为碳,优选包括3至12个或3至8个或3至6个环原子的杂环基,例如,“3‑6元杂环基”指包含3至6个环原子的环基,“4‑8元杂环基”指包含4至8个环原子的环基,“3‑8元杂环基”指包含3至8个环原子的环基,“4‑10元杂环基”指包含4至10个环原子的环基,“3‑12元杂环基”指包含3至12个环原子的环基。[0093] 单环杂环基包括但不限于吡咯烷基、哌啶基、哌嗪基、吗啉基、硫代吗啉基、高哌嗪基等。[0094] 多环杂环基包括螺环、稠环和桥环的杂环基。“螺杂环基”指单环之间共用一个原子(称螺原子)的多环杂环基团,其中一个或多个(优选1、2、3或4个)环原子选自氮、氧或S(O)r(其中r是整数0、1、2)的杂原子,其余环原子为碳。这些可以含有一个或多个双键(优选1、2或3个),但没有一个环具有完全共轭的π电子系统。根据环与环之间共用螺原子的数目将螺杂环基分为单螺杂环基、双螺杂环基或多螺杂环基。螺杂环基包括但不限于:[0095][0096] “稠杂环基”指系统中的每个环与体系中的其他环共享毗邻的一对原子的多环杂环基团,一个或多个(优选1、2、3或4个)环可以含有一个或多个(优选1、2或3个)双键,但没有一个环具有完全共轭的π电子系统,其中一个或多个(优选1、2、3或4个)环原子选自氮、氧或S(O)r(其中r是整数0、1、2)的杂原子,其余环原子为碳。根据组成环的数目可以分为双环、三环、四环或多环稠杂环烷基,稠杂环基包括但不限于:[0097][0098] “桥杂环基”指任意两个环共用两个不直接连接的原子的多环杂环基团,这些可以含有一个或多个(优选1、2或3个)双键,但没有一个环具有完全共轭的π电子系统,其中一个或多个(优选1、2、3或4个)环原子选自氮、氧或S(O)r(其中r是整数0、1、2)的杂原子,其余环原子为碳。根据组成环的数目可以分为双环、三环、四环或多环桥杂环基,桥杂环基包括但不限于:[0099][0100] 所述杂环基环可以稠合于芳基、杂芳基或环烷基环上,其中与母体结构连接在一起的环为杂环基,包括但不限于:[0101][0102] 杂环基可以是任选取代的或未取代的,当被取代时,取代基优选为一个或多个(优选1、2、3或4个)以下基团,独立地选自氘、卤素、氰基、硝基、叠氮基、C1‑10烷基、C2‑10链烯基、C2‑10链炔基、卤取代C1‑10烷基、氘取代C1‑10烷基、C3‑12环烷基、3‑12元杂环基、C6‑10芳基、5‑10元杂芳基、=O、‑SF5、‑S(O)rR5、‑O‑R6、‑C(O)OR6、‑C(O)R7、‑O‑C(O)R7、‑NR8R9、‑P(O)R8R9、‑C(=NR8)R7、‑N(R8)‑C(=NR9)R7、‑C(O)NR8R9和‑N(R8)‑C(O)R7的取代基所取代。[0103] “芳基”或“芳环”指全碳单环或稠合多环(也就是共享毗邻碳原子对的环)基团,具有共轭的π电子体系的多环(即其带有相邻对碳原子的环)基团,优选含有6‑10个或6‑8个碳的全碳芳基,例如,“C6‑10芳基”指含有6‑10个碳的全碳芳基,“C6‑8芳基”指含有6‑8个碳的全碳芳基,包括但不限于苯基和萘基。所述芳基环可以稠合于杂芳基、杂环基或环烷基环上,其中与母体结构连接在一起的环为芳基环,包括但不限于:[0104][0105] “芳基”可以是取代的或未取代的,当被取代时,取代基优选为一个或多个(优选1、2、3或4个)以下基团,独立地选自氘、卤素、氰基、硝基、叠氮基、C1‑10烷基、C2‑10链烯基、C2‑10链炔基、卤取代C1‑10烷基、氘取代C1‑10烷基、C3‑12环烷基、3‑12元杂环基、C6‑10芳基、5‑10元杂芳基、=O、‑SF5、‑S(O)rR5、‑O‑R6、‑C(O)OR6、‑C(O)R7、‑O‑C(O)R7、‑NR8R9、‑P(O)R8R9、‑C(=NR8)R7、‑N(R8)‑C(=NR9)R7、‑C(O)NR8R9和‑N(R8)‑C(O)R7的取代基所取代。[0106] “杂芳基”指包含一个或多个(优选1、2、3或4个)杂原子的杂芳族体系,所述杂原子包括氮、氧和S(O)r(其中r是整数0、1、2)的杂原子,优选含有5‑10个或5‑8个或5‑6个环原子的杂芳族体系,例如,5‑6元杂芳基指含有5‑6个环原子的杂芳族体系,5‑8元杂芳基指含有5‑8个环原子的杂芳族体系,5‑10元杂芳基指含有5‑10个环原子的杂芳族体系,包括但不限于呋喃基、噻吩基、吡啶基、吡咯基、N‑烷基吡咯基、嘧啶基、吡嗪基、咪唑基、四唑基等。所述杂芳基环可以稠合于芳基、杂环基或环烷基环上,其中与母体结构连接在一起的环为杂芳基环,包括但不限于:[0107][0108] “杂芳基”可以是任选取代的或未取代的,当被取代时,取代基优选为一个或多个(优选1、2、3或4个)以下基团,独立地选自氘、卤素、氰基、硝基、叠氮基、C1‑10烷基、C2‑10链烯基、C2‑10链炔基、卤取代C1‑10烷基、氘取代C1‑10烷基、C3‑12环烷基、3‑12元杂环基、C6‑10芳基、5‑10元杂芳基、=O、‑SF5、‑S(O)rR5、‑O‑R6、‑C(O)OR6、‑C(O)R7、‑O‑C(O)R7、‑NR8R9、‑P(O)R8R9、‑C(=NR8)R7、‑N(R8)‑C(=NR9)R7、‑C(O)NR8R9和‑N(R8)‑C(O)R7的取代基所取代。[0109] “链烯基”指由至少两个碳原子和至少一个碳‑碳双键组成的如上述定义的烷基,优选含有2‑10个或2‑4个碳的直链或含支链烯基,例如,C2‑10链烯基指含有2‑10个碳的直链或含支链烯基,C2‑4链烯基指含有2‑4个碳的直链或含支链烯基。包括但不限于乙烯基、1‑丙烯基、2‑丙烯基、1‑,2‑或3‑丁烯基等。[0110] “链烯基”可以是取代的或未取代的,当被取代时,取代基优选为一个或多个(优选1、2、3或4个)以下基团,独立地选自氘、卤素、氰基、硝基、叠氮基、C1‑10烷基、C2‑10链烯基、C2‑10链炔基、卤取代C1‑10烷基、氘取代C1‑10烷基、C3‑12环烷基、3‑12元杂环基、C6‑10芳基、5‑10元杂芳基、=O、‑SF5、‑S(O)rR5、‑O‑R6、‑C(O)OR6、‑C(O)R7、‑O‑C(O)R7、‑NR8R9、‑P(O)R8R9、‑C(=NR8)R7、‑N(R8)‑C(=NR9)R7、‑C(O)NR8R9和‑N(R8)‑C(O)R7的取代基所取代。[0111] “链炔基”指至少两个碳原子和至少一个碳‑碳三键组成的如上所定义的烷基,优选含有2‑10个或2‑4个碳的直链或含支链炔基,例如,C2‑10链炔基指含有2‑10个碳的直链或含支链炔基,C2‑4链炔基指含有2‑4个碳的直链或含支链炔基。包括但不限于乙炔基、1‑丙炔基、2‑丙炔基、1‑,2‑或3‑丁炔基等。[0112] “链炔基”可以是取代的或未取代的,当被取代时,取代基优选为一个或多个(优选1、2、3或4个)以下基团,独立地选自氘、卤素、氰基、硝基、叠氮基、C1‑10烷基、C2‑10链烯基、C2‑10链炔基、卤取代C1‑10烷基、氘取代C1‑10烷基、C3‑12环烷基、3‑12元杂环基、C6‑10芳基、5‑10元杂芳基、=O、‑SF5、‑S(O)rR5、‑O‑R6、‑C(O)OR6、‑C(O)R7、‑O‑C(O)R7、‑NR8R9、‑P(O)R8R9、‑C(=NR8)R7、‑N(R8)‑C(=NR9)R7、‑C(O)NR8R9和‑N(R8)‑C(O)R7的取代基所取代。[0113] “烷氧基”指‑O‑烷基,其中烷基的定义如上所述,例如,“C1‑10烷氧基”指含1‑10个碳的烷基氧基,“C1‑4烷氧基”指含1‑4个碳的烷基氧基包括但不限于甲氧基、乙氧基、丙氧基、丁氧基等。[0114] “烷氧基”可以是任选取代的或未取代的,当被取代时,取代基优选为一个或多个(优选1、2、3或4个)以下基团,独立地选自氘、卤素、氰基、硝基、叠氮基、C1‑10烷基、C2‑10链烯基、C2‑10链炔基、卤取代C1‑10烷基、氘取代C1‑10烷基、C3‑12环烷基、3‑12元杂环基、C6‑10芳基、5‑10元杂芳基、=O、‑SF5、‑S(O)rR5、‑O‑R6、‑C(O)OR6、‑C(O)R7、‑O‑C(O)R7、‑NR8R9、‑P(O)R8R9、‑C(=NR8)R7、‑N(R8)‑C(=NR9)R7、‑C(O)NR8R9和‑N(R8)‑C(O)R7的取代基所取代。[0115] “环烷氧基”指‑O‑环烷基,其中环烷基的定义如上所述,例如,“C3‑12环烷氧基”指含3‑12个碳的环烷基氧基,“C3‑8环烷氧基”指含3‑8个碳的环烷基氧基,包括但不限于环丙氧基、环丁氧基、环戊氧基、环己氧基等。[0116] “环烷氧基”可以是任选取代的或未取代的,当被取代时,取代基优选为一个或多个(优选1、2、3或4个)以下基团,独立地选自氘、卤素、氰基、硝基、叠氮基、C1‑10烷基、C2‑10链烯基、C2‑10链炔基、卤取代C1‑10烷基、氘取代C1‑10烷基、C3‑12环烷基、3‑12元杂环基、C6‑10芳基、5‑10元杂芳基、=O、‑SF5、‑S(O)rR5、‑O‑R6、‑C(O)OR6、‑C(O)R7、‑O‑C(O)R7、‑NR8R9、‑P(O)R8R9、‑C(=NR8)R7、‑N(R8)‑C(=NR9)R7、‑C(O)NR8R9和‑N(R8)‑C(O)R7的取代基所取代。[0117] “杂环氧基”指‑O‑杂环基,其中杂环基的定义如上所述,杂环基氧基,包括但不限于氮杂环丁基氧基、氧杂环丁氧基、氮杂环戊基氧基、氮、氧杂环己基氧基等。[0118] “杂环氧基”可以是任选取代的或未取代的,当被取代时,取代基优选为一个或多个(优选1、2、3或4个)以下基团,独立地选自氘、卤素、氰基、硝基、叠氮基、C1‑10烷基、C2‑10链烯基、C2‑10链炔基、卤取代C1‑10烷基、氘取代C1‑10烷基、C3‑12环烷基、3‑12元杂环基、C6‑10芳基、5‑10元杂芳基、=O、‑SF5、‑S(O)rR5、‑O‑R6、‑C(O)OR6、‑C(O)R7、‑O‑C(O)R7、‑NR8R9、‑P(O)R8R9、‑C(=NR8)R7、‑N(R8)‑C(=NR9)R7、‑C(O)NR8R9和‑N(R8)‑C(O)R7的取代基所取代。[0119] “C1‑10烷酰基”指C1‑10烷基酸去掉羟基后剩下的一价原子团,通常也表示为“C0‑9烷基‑C(O)‑”,例如,“C1烷基‑C(O)‑”是指乙酰基;“C2烷基‑C(O)‑”是指丙酰基;“C3烷基‑C(O)‑”是指丁酰基或异丁酰基。[0120] “卤取代C1‑10烷基”指烷基上的氢任选的被氟、氯、溴、碘原子取代的1‑10个碳烷基团,包括但不限于二氟甲基(‑CHF2)、二氯甲基(‑CHCl2)、二溴甲基(‑CHBr2)、三氟甲基(‑CF3)、三氯甲基(‑CCl3)、三溴甲基(‑CBr3)等。[0121] “卤取代C1‑10烷氧基”指烷基上的氢任选的被氟、氯、溴、碘原子取代的1‑10个碳烷氧基团。包括但不限于二氟甲氧基、二氯甲氧基、二溴甲氧基、三氟甲氧基、三氯甲氧基、三溴甲氧基等。[0122] “氘取代C1‑10烷基”指烷基上的氢任选的被氘原子取代的1‑10个碳烷基团。包括但不限于一氘甲基(‑CH2D)、二氘甲基(‑CHD2)、三氘甲基(‑CD3)等。[0123] “氘取代C1‑10烷氧基”指烷基上的氢任选的被氘原子取代的1‑10个碳烷基团。包括但不限于一氘甲氧基、二氘甲氧基、三氘甲氧基等。[0124] “卤素”指氟、氯、溴或碘。[0125] “任选”或“任选地”意味着随后所描述地事件或环境可以但不必发生,该说明包括该事件或环境发生或不发生地场合,也即包括取代的或未取代的两种情形。例如,“任选被烷基取代的杂环基团”意味着烷基可以但不必须存在,该说明包括杂环基团被烷基取代的情形和杂环基团不被烷基取代的情形。[0126] “取代的”指基团中的一个或多个“氢原子”彼此独立地被相应数目的取代基取代。不言而喻,取代基仅处在它们的可能的化学位置,符合化学上的价键理论,本领域技术人员能够在不付出过多努力的情况下确定(通过实验或理论)可能或不可能的取代。例如,具有游离氢的氨基或羟基与具有不饱和键的碳原子(如烯烃)结合时可能是不稳定的。[0127] “立体异构体”,其英文名称为stereoisomer,是指由分子中原子在空间上排列方式不同所产生的异构体,它可分为顺反异构体、对映异构体两种,也可分为对映异构体和非对映异构体两大类。由于单键的旋转而引起的立体异构体称为构象异构体(conformationalstereo‑isomer),有时也称为旋转异构体(rotamer)。因键长、键角、分子内有双键、有环等原因引起的立体异构体称为构型异构体(configurationstereo‑isomer),构型异构体又分为两类。其中因双键或成环碳原子的单键不能自由旋转而引起的异构体成为几何异构体(geometricisomer),也称为顺反异构体(cis‑transisomer),分为Z、E两种构型。例如:顺‑2‑丁烯和反‑2‑丁烯是一对几何异构体,本发明化合物如果包含双键,如未特别指明,可理解为包含E和/或Z型。因分子中没有反轴对称性而引起的具有不同旋光性能的立体异构体称为旋光异构体(opticalisomer),分为R、S构型。在本发明中所述“立体异构体”如未特别指明,可理解为包含上述对映异构体、构型异构体和构象异构体中的一种或几种,优选为S构型。[0128] “药学上可接受盐”在本发明中是指药学上可接受的酸加成盐或碱加成盐,包括无机酸盐和有机酸盐,这些盐可通过本专业已知的方法制备。[0129] “药物组合物”表示含有一种或多种本文所述化合物或其生理学上/可药用的盐或前体药物与其他化学组分的混合物,以及其他组分例如生理学/可药用的载体和赋形剂。药物组合物的目的是促进对生物体的给药,利于活性成分的吸收进而发挥生物活性。[0130] 下面结合实施例对本发明做进一步详细、完整地说明,但决非限制本发明,本发明也并非仅局限于实施例的内容。[0131] 本发明的化合物结构是通过核磁共振(NMR)或/和液质联用色谱(LC‑MS)来确定的。NMR化学位移(δ)以百万分之一(ppm)的单位给出。NMR的测定是用BrukerAVANCE‑400/500核磁仪,测定溶剂为氘代二甲基亚砜(DMSO‑d6),氘代甲醇(CD3OD)和氘代氯仿(CDCl3),内标为四甲基硅烷(TMS)。[0132] 液质联用色谱LC‑MS的测定用Agilent6120质谱仪。HPLC的测定使用安捷伦1200DAD高压液相色谱仪(SunfireC18150×4.6mm色谱柱)和Waters2695‑2996高压液相色谱仪(GiminiC18150×4.6mm色谱柱)。[0133] 薄层层析硅胶板使用烟台黄海HSGF254或青岛GF254硅胶板,TLC采用的规格是0.15mm~0.20mm,薄层层析分离纯化产品采用的规格是0.4mm~0.5mm。柱层析一般使用烟台黄海硅胶200~300目硅胶为载体。[0134] 本发明实施例中的起始原料是已知的并且可以在市场上买到,或者可以采用或按照本领域已知的方法来合成。[0135] 在无特殊说明的情况下,本发明的所有反应均在连续的磁力搅拌下,在干燥氮气或氩气氛下进行,溶剂为干燥溶剂,反应温度单位为摄氏度(℃)。[0136] 一、具体实施例的制备[0137] 实施例1a和实施例1b:(S)‑N‑(11‑氨基‑12‑(喹啉‑3‑基)‑5,6‑二氢嘧啶并[5′,4′:4,5]吡咯并[2,1‑a]异喹啉‑5‑基)丙烯酰胺和(R)‑N‑(11‑氨基‑12‑(喹啉‑3‑基)‑5,6‑二氢嘧啶并[5′,4′:4,5]吡咯并[2,1‑a]异喹啉‑5‑基)丙烯酰胺的制备[0138][0139] 第一步:2‑(2‑溴苯基)噁丙环的合成[0140][0141] 将邻溴苯甲醛(55.5g,0.3mol),三甲基碘化锍(71g,0.34mol)溶于DMF(200mL),加入氢氧化钾(33.6g,0.6mol)反应在室温下搅拌1小时,LCMS显示反应完全,反应液用饱和NaHCO3水溶液(500mL),乙酸乙酯(500mL)分层萃取,有机相无水硫酸镁干燥,过滤。滤液浓缩,得粗品2‑(2‑溴苯基)噁丙环(60g,产率96%),产品无需进一步纯化直接用于下一步反应。[0142] 第二步:叔‑丁基(1‑(2‑溴苯基)‑2‑羟乙基)氨基甲酸酯的合成[0143][0144] 将2‑(2‑溴苯基)噁丙环(60g,0.3mol)溶于乙腈(500mL)中,缓慢滴入浓硫酸(59g,0.6mol)。反应在室温下搅拌8小时,加入水(300mL),反应在50℃下继续搅拌16小时,LCMS显示反应完全。反应液加入乙酸乙酯(200mL),水(200mL)分层,有机相弃去,水相用6MNaOH调节pH至9~10。向水溶液中加入Boc2O(122g,0.56mol),反应在室温下搅拌2小时,所得混合物过滤,滤饼用水(100mL),甲基叔丁基醚(3*20mL)洗涤,收集滤饼干燥得到叔‑丁基(1‑(2‑+溴苯基)‑2‑羟乙基)氨基甲酸酯(25.5g,产率29%)。ESI‑MS:260[M‑56]。[0145] 第三步:叔‑丁基(1‑(2‑溴苯基)‑2‑(4‑氯‑5‑碘‑7H‑吡咯并[2,3‑d]嘧啶‑7‑基)乙基)氨基甲酸酯的合成[0146][0147] 将4‑氯‑5‑碘‑7H‑吡咯并[2,3‑d]嘧啶(5.0g,17.8mmol),叔‑丁基(1‑(2‑溴苯基)‑2‑羟乙基)氨基甲酸酯(4.7g,14.9mmol),三苯基膦(7.8g,29.8mmol)溶于无水四氢呋喃(200mL)中,反应在氮气保护下搅拌10分钟,再加入DEAD(5.2g,29.8mmol),反应在氮气保护24℃下搅拌16小时,LCMS显示反应完全,反应液浓缩得到粗品叔‑丁基(1‑(2‑溴苯基)‑2‑(4‑氯‑5‑碘‑7H‑吡咯并[2,3‑d]嘧啶‑7‑基)乙基)氨基甲酸酯(9.0g,产率99%)。ESI‑MS:+577[M+H]。反应直接用于下一步反应。[0148] 第四步:叔‑丁基(1‑(2‑溴苯基)‑2‑(4‑氨基‑5‑碘‑7H‑吡咯并[2,3‑d]嘧啶‑7‑基)乙基)氨基甲酸酯的合成[0149][0150] 将叔‑丁基(1‑(2‑溴苯基)‑2‑(4‑氯‑5‑碘‑7H‑吡咯并[2,3‑d]嘧啶‑7‑基)乙基)氨基甲酸酯(9.0g,17.8mmol)溶于四氢呋喃(200mL)和水(50mL)中,加入浓氨水(50mL)。反应在封管100℃下搅拌16小时,LCMS显示反应完全,所得混合物过滤,滤饼用甲基叔丁基醚(2*30mL)洗涤,收集滤饼得到叔‑丁基(1‑(2‑溴苯基)‑2‑(4‑氨基‑5‑碘‑7H‑吡咯并[2,3‑d]嘧+啶‑7‑基)乙基)氨基甲酸酯(6.45g,产率65%)。ESI‑MS:558[M+H]。[0151] 第五步:叔‑丁基(1‑(2‑溴苯基)‑2‑(4‑氨基‑5‑(喹啉‑3)‑7H‑吡咯并[2,3‑d]嘧啶‑7‑基)乙基)氨基甲酸酯的合成[0152][0153] 将叔‑丁基(1‑(2‑溴苯基)‑2‑(4‑氨基‑5‑碘‑7H‑吡咯并[2,3‑d]嘧啶‑7‑基)乙基)氨基甲酸酯(4.3g,7.7mmol),喹啉‑3‑硼酸(2.0g,11.56mmol),Pd(dppf)Cl2(281mg,0.38mmol),碳酸钠(2.5g,23.12mmol)溶于二氧六环(200mL)和水(20mL)中,反应在氮气保护60℃下搅拌2小时,LCMS显示反应完全,反应液加水(100mL)后浓缩至约(150mL),所得混合物过滤,滤饼用乙酸乙酯(2*20mL)洗涤,收集滤饼得到叔‑丁基(1‑(2‑溴苯基)‑2‑(4‑氨基‑5‑(喹啉‑3)‑7H‑吡咯并[2,3‑d]嘧啶‑7‑基)乙基)氨基甲酸酯(3.91g,产率90%)。ESI‑+MS:559[M+H]。[0154] 第六步:(11‑氨基‑12‑(喹啉‑3‑基)‑5,6‑二氢嘧啶并[5′,4′:4,5]吡咯并[2,1‑a]异喹啉‑5‑基)氨基甲酸叔丁酯的合成[0155][0156] 将叔‑丁基(1‑(2‑溴苯基)‑2‑(4‑氨基‑5‑(喹啉‑3)‑7H‑吡咯并[2,3‑d]嘧啶‑7‑基)乙基)氨基甲酸酯(2.1g,3.76mmol),Pd2(dba)3(340mg,0.37mmol),三环己基膦(208mg,0.74mmol),氢氧化钠(752mg,18.8mmol)溶于二氧六环(100mL)和水(20mL)中,反应在氮气保护110℃下搅拌16小时,LCMS显示反应完全,反应液浓缩干,剩余物用饱和NaHCO3水溶液(100mL)和二氯甲烷(100mL)分层萃取,有机相通过无水硫酸镁干燥,过滤。滤液浓缩,剩余物通过快速硅胶柱层析分离[0~40%EA∶PE,EA相含20%EtOH]得到(11‑氨基‑12‑(喹啉‑3‑基)‑5,6‑二氢嘧啶并[5′,4′:4,5]吡咯并[2,1‑a]异喹啉‑5‑基)氨基甲酸叔丁酯(1.42g,产+率79%)。ESI‑MS:479[M+H]。[0157] 第七步:12‑(喹啉‑3‑基)‑5,6‑二氢嘧啶并[5′,4′:4,5]吡咯并[2,1‑a]异喹啉‑5,11‑二胺的合成[0158][0159] 将(11‑氨基‑12‑(喹啉‑3‑基)‑5,6‑二氢嘧啶并[5′,4′:4,5]吡咯并[2,1‑a]异喹啉‑5‑基)氨基甲酸叔丁酯(1.42g,2.97mmol)溶于4M氯化氢二氧六环溶液(30mL)中,反应在24℃下搅拌1小时,LCMS显示反应完全,将反应液浓缩干,剩余物用甲基叔丁基醚(3*30mL)洗涤后得到12‑(喹啉‑3‑基)‑5,6‑二氢嘧啶并[5′,4′:4,5]吡咯并[2,1‑a]异喹啉‑5,11‑二+胺(1.01g,产率90%)。ESI‑MS:379[M+H]。[0160] 第八步:N‑(11‑氨基‑12‑(喹啉‑3‑基)‑5,6‑二氢嘧啶并[5′,4′:4,5]吡咯并[2,1‑a]异喹啉‑5‑基)丙烯酰胺的合成[0161][0162] 将12‑(喹啉‑3‑基)‑5,6‑二氢嘧啶并[5′,4′:4,5]吡咯并[2,1‑a]异喹啉‑5,11‑二胺(600mg,1.59mmol),三乙胺(1mL)溶于二氯甲烷(10mL)中,0℃下缓慢滴加丙烯酰氯(171mg,1.9mmol),反应在0~24℃下搅拌1小时,LCMS显示反应完全,将反应用饱和NaHCO3水溶液(10mL)淬灭,反应液浓缩干,剩余物通过快速反相硅胶色谱柱分离[0~40%MeCN∶H2O]后得到N‑(11‑氨基‑12‑(喹啉‑3‑基)‑5,6‑二氢嘧啶并[5′,4′:4,5]吡咯并[2,1‑a]异+喹啉‑5‑基)丙烯酰胺(203mg,产率28%)。ESI‑MS:433[M+H]。[0163] 第九步:(S)‑N‑(11‑氨基‑12‑(喹啉‑3‑基)‑5,6‑二二氢嘧啶并[5′,4′:4,5]吡咯并[2,1‑a]异喹啉‑5‑基)丙烯酰胺和(R)‑N‑(11‑氨基‑12‑(喹啉‑3‑基)‑5,6‑二氢嘧啶并[5′,4′:4,5]吡咯并[2,1‑a]异喹啉‑5‑基)丙烯酰胺的合成[0164][0165] 将N‑(11‑氨基‑12‑(喹啉‑3‑基)‑5,6‑二氢嘧啶并[5′,4′:4,5]吡咯并[2,1‑a]异喹啉‑5‑基)丙烯酰胺(203mg,0.20mmol)通过手性拆分分离得到:[0166] (1a)(S)‑N‑(11‑氨基‑12‑(喹啉‑3‑基)‑5,6‑二氢嘧啶并[5′,4′:4,5]吡咯并[2,1‑a]异喹啉‑5‑基)丙烯酰胺(28.2mg,拆分回收率14%)。[0167] 1HNMR(400MHz,Methanol‑d4)δ8.89(d,J=2.2Hz,1H),8.49(d,J=2.5Hz,1H),8.06(dd,J=5.6,2.3Hz,2H),7.95(d,J=8.2Hz,1H),7.79(ddd,J=8.5,6.9,1.5Hz,1H),7.63(t,J=7.6Hz,1H),7.40(d,J=7.6Hz,1H),7.18(t,J=7.5Hz,1H),6.94(tt,J=7.8,1.8Hz,1H),6.88‑6.79(m,1H),6.26‑6.10(m,2H),5.58(dd,J=9.5,2.6Hz,1H),5.43(t,J=+4.2Hz,1H),4.45(s,2H),4.18(d,J=12.9Hz,1H)。ESI‑MS:433[M+H]。[0168] (1b)(R)‑N‑(11‑氨基‑12‑(喹啉‑3‑基)‑5,6‑二氢嘧啶并[5′,4′:4,5]吡咯并[2,1‑a]异喹啉‑5‑基)丙烯酰胺(14.3mg,拆分回收率7%)。[0169] 1HNMR(400MHz,Methanol‑d4)δ8.90(d,J=2.2Hz,1H),8.50(d,J=2.4Hz,1H),8.12‑8.02(m,2H),7.96(d,J=8.0Hz,1H),7.79(ddd,J=8.5,6.8,1.4Hz,1H),7.63(t,J=7.6Hz,1H),7.40(d,J=7.6Hz,1H),7.18(t,J=7.6Hz,1H),6.95(t,J=7.7Hz,1H),6.85(d,J=7.9Hz,1H),6.32‑6.09(m,2H),5.58(dd,J=9.5,2.6Hz,1H),5.44(t,J=4.2Hz,1H),+4.45(s,2H),4.19(d,J=13.2Hz,1H)。ESI‑MS:433[M+H]。[0170] 实施例2a~38b可参照实施例1、1a、1b全部或部分合成方法选择相应的原料进行制备:[0171][0172][0173][0174][0175] 实施例39:N‑(11‑氨基‑2‑氟‑12‑(喹啉‑3‑基)‑5,6‑二氢嘧啶并[5′,4′:4,5]吡咯并[2,1‑a]异喹啉‑5‑基)‑N‑甲基丙烯酰胺的制备[0176][0177] 第一步:2‑溴‑1‑(2‑溴‑4‑氟苯基)乙烷‑1‑酮的合成[0178][0179] 将1‑(2‑溴‑4‑氟苯基)乙烷‑1‑酮(6.2g,28.4mmol)溶于乙酸(20mL),加入三溴吡啶(9.3g,29.1mmol)。该反应在70℃条件下搅拌反应2小时。向反应中加入水(60mL),使用甲基叔丁基醚(30mL*2)萃取。合并有机相,并使用饱和碳酸氢钠水溶液(30mL*3)洗涤有机相。将有机相干燥浓缩后得到2‑溴‑1‑(2‑溴‑4‑氟苯基)乙烷‑1‑酮粗品,直接用于下一步反应。[0180] 第二步:1‑(2‑溴‑4‑氟苯基)‑2‑(4‑氯‑5‑碘‑7H‑吡咯并[2,3‑d]嘧啶‑7‑基)乙烷‑1‑酮的合成[0181][0182] 将2‑溴‑1‑(2‑溴‑4‑氟苯基)乙烷‑1‑酮粗品溶于乙腈(40mL),加入4‑氯‑5‑碘‑7H‑吡咯并[2,3‑d]嘧啶(7.9g,28.4mmol)和碳酸钾(3.9g,28.3mmol)。该反应溶液在60℃条件下反应1小时。加入水(100mL),使用乙酸乙酯(40mL*3)萃取。合并有机相,浓缩得到1‑(2‑溴‑4‑氟苯基)‑2‑(4‑氯‑5‑碘‑7H‑吡咯并[2,3‑d]嘧啶‑7‑基)乙烷‑1‑酮的粗品,直接用于+下一步反应。ESI‑MS493.9[M+H]。[0183] 第三步:2‑(4‑氨基‑5‑碘‑7H‑吡咯并[2,3‑d]嘧啶‑7‑基)‑1‑(2‑溴‑4‑氟苯基)乙烷‑1‑酮的合成[0184][0185] 将1‑(2‑溴‑4‑氟苯基)‑2‑(4‑氯‑5‑碘‑7H‑吡咯并[2,3‑d]嘧啶‑7‑基)乙烷‑1‑酮的粗品溶于四氢呋喃(50mL),加入氨水(20mL),在密封罐中100℃的条件下反应16小时。向反应液中加入水(100mL),使用乙酸乙酯(50mL*3)萃取。合并有机相,无水硫酸镁干燥,过滤,浓缩后使用正相柱分离[甲醇∶二氯甲烷=0%‑10%]得到2‑(4‑氨基‑5‑碘‑7H‑吡咯并[2,3‑d]嘧啶‑7‑基)‑1‑(2‑溴‑4‑氟苯基)乙烷‑1‑酮(2.2g,三步总收率:16%)。ESI‑MS:+475.0[M+H]。[0186] 第四步:2‑(4‑氨基‑5‑(喹啉‑3‑基)‑7H‑吡咯并[2,3‑d]嘧啶‑7‑基)‑1‑(2‑溴‑4‑氟苯基)乙烷‑1‑酮的合成[0187][0188] 将2‑(4‑氨基‑5‑碘‑7H‑吡咯并[2,3‑d]嘧啶‑7‑基)‑1‑(2‑溴‑4‑氟苯基)乙烷‑1‑酮(2.2g,4.7mmol)溶于二氧六环(30mL)和水(6mL)的混合溶剂,加入喹啉‑3‑基硼酸(1.2g,6.8mmol),碳酸钾(2.1g,14.9mmol)和[1,1′‑双(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(0.22g,0.27mmol)。该反应液在氮气保护和60℃条件下反应18小时。向反应液中加入水(100mL),使用乙酸乙酯(40mL*3)萃取。合并有机相,无水硫酸镁干燥,过滤,浓缩后使用正相柱分离[甲醇∶二氯甲烷=0%‑5%]得到2‑(4‑氨基‑5‑(喹啉‑3‑基)‑7H‑吡咯并[2,3‑d]嘧啶‑7‑基)‑+1‑(2‑溴‑4‑氟苯基)乙烷‑1‑酮粗品(0.63g)。ESI‑MS:476.0[M+H]。[0189] 第五步:7‑(2‑(2‑溴‑4‑氟苯基)‑2‑(甲基亚氨基)乙基)‑5‑(喹啉‑3‑基)‑7H‑吡咯并[2,3‑d]嘧啶‑4‑胺的合成[0190][0191] 将2‑(4‑氨基‑5‑(喹啉‑3‑基)‑7H‑吡咯并[2,3‑d]嘧啶‑7‑基)‑1‑(2‑溴‑4‑氟苯基)乙烷‑1‑酮粗品(0.63g,1.3mmol)溶于二氯甲烷(30mL),加入四异丙氧基钛(3.7g,12.9mmol),盐酸甲胺(0.97g,14.3mmol)和三乙胺(3mL,40.6mmol)。该反应液在50℃条件下反应1小时。向反应液中加入水(100mL),过滤,将滤液回收,分离有机相浓缩得到7‑(2‑(2‑溴‑4‑氟苯基)‑2‑(甲基亚氨基)乙基)‑5‑(喹啉‑3‑基)‑7H‑吡咯并[2,3‑d]嘧啶‑4‑胺粗品+(0.78g),直接用于下一步反应。ESI‑MS:489.0[M+H]。[0192] 第六步:7‑(2‑(2‑溴‑4‑氟苯基)‑2‑(甲基氨基)乙基)‑5‑(喹啉‑3‑基)‑7H‑吡咯并[2,3‑d]嘧啶‑4‑胺的合成[0193][0194] 将7‑(2‑(2‑溴‑4‑氟苯基)‑2‑(甲基亚氨基)乙基)‑5‑(喹啉‑3‑基)‑7H‑吡咯并[2,3‑d]嘧啶‑4‑胺粗品(0.78g)溶于N,N‑二甲基甲酰胺(12mL)和乙酸(3mL)的混合溶剂,加入氰基硼氢化钠(0.64g,10.2mmol)。该反应液在室温条件下反应30分钟。往反应液中加入水(80mL),使用氢氧化钠将反应液的pH调整为9以上,分离得到含有7‑(2‑(2‑溴‑4‑氟苯基)‑2‑(甲基氨基)乙基)‑5‑(喹啉‑3‑基)‑7H‑吡咯并[2,3‑d]嘧啶‑4‑胺的溶液,直接用于下一+步反应。ESI‑MS:491.0[M+H]。[0195] 第七步:叔丁基(2‑(4‑氨基‑5‑(喹啉‑3‑基)‑7H‑吡咯并[2,3‑d]嘧啶‑7‑基)‑1‑(2‑溴‑4‑氟苯基)乙基氨基甲酸甲酯的合成[0196][0197] 向上一步反应溶液中加入二氯甲烷(10mL)和二碳酸二叔丁酯(4mL,19.3mmol)。该反应液在室温下搅拌反应16小时。向反应液中加入水(100mL),使用乙酸乙酯(50mL*3)萃取。合并有机相,使用无水硫酸镁干燥,过滤,浓缩有机相后使用正相柱分离分离[甲醇∶二氯甲烷=0%‑4%]得到叔丁基(2‑(4‑氨基‑5‑(喹啉‑3‑基)‑7H‑吡咯并[2,3‑d]嘧啶‑7‑+基)‑1‑(2‑溴‑4‑氟苯基)乙基氨基甲酸甲酯粗品(0.26g)。ESI‑MS:591.2[M+H]。[0198] 第八步:叔丁基(11‑氨基‑2‑氟‑12‑(喹啉‑3‑基)‑5,6‑二氢嘧啶[5′,4′:4,5]吡咯并[2,1‑a]异喹啉‑5‑氨基甲酸(甲基)酯的合成[0199][0200] 将叔丁基(2‑(4‑氨基‑5‑(喹啉‑3‑基)‑7H‑吡咯并[2,3‑d]嘧啶‑7‑基)‑1‑(2‑溴‑4‑氟苯基)乙基氨基甲酸甲酯粗品(0.26g,0.4mmol)溶于二氧六环(8mL)和水(1mL)的混合溶剂,加入醋酸钯(0.03g,0.1mmol),三环己基膦(0.07g,0.26mM)和氢氧化钠(0.05g,1.3mmol)。该反应液在氮气保护和100℃条件下反应3.5小时。向反应液中加入水(20mL),使用乙酸乙酯(20mL*3)萃取。合并有机相,无水硫酸镁干燥,过滤,浓缩后得到叔丁基(11‑氨基‑2‑氟‑12‑(喹啉‑3‑基)‑5,6‑二氢嘧啶[5′,4′:4,5]吡咯并[2,1‑a]异喹啉‑5‑氨基甲酸+(甲基)酯粗品,直接用于下一步反应。ESI‑MS511.2[M+H]。[0201] 第九步:2‑氟‑N5‑甲基‑12‑(喹啉‑3‑基)‑5,6‑二氢嘧啶并[5′,4′:4,5]吡咯并[2,1‑a]异喹啉‑5,11‑二胺的合成[0202][0203] 将叔丁基(11‑氨基‑2‑氟‑12‑(喹啉‑3‑基)‑5,6‑二氢嘧啶[5′,4′:4,5]吡咯并[2,1‑a]异喹啉‑5‑氨基甲酸(甲基)酯粗品溶于二氧六环(20mL),加入4M氯化氢的二氧六环溶液(20mL)。该反应在室温条件下搅拌反应2小时。浓缩后使用反相柱分离分离[乙腈∶水=510%‑15%]得到2‑氟‑N ‑甲基‑12‑(喹啉‑3‑基)‑5,6‑二氢嘧啶并[5′,4′:4,5]吡咯并[2,+1‑a]异喹啉‑5,11‑二胺(8.4mg,六步反应总收率:4%)。ESI‑MS:411.0[M+H]。[0204] 第十步:N‑(11‑氨基‑2‑氟‑12‑(喹啉‑3‑基)‑5,6‑二氢嘧啶并[5′,4′:4,5]吡咯并[2,1‑a]异喹啉‑5‑基)‑N‑甲基丙烯酰胺的合成[0205][0206] 将2‑氟‑N5‑甲基‑12‑(喹啉‑3‑基)‑5,6‑二氢嘧啶并[5′,4′:4,5]吡咯并[2,1‑a]异喹啉‑5,11‑二胺(8.4mg,0.02mmol)溶于二氯甲烷(5mL)中,加入N,N‑二异丙基乙胺(0.5mL,3.0mM)和丙烯酰氯(2.9mg,0.03mmol)。该反应液在室温下反应1小时。将反应液浓缩后使用高效液相色谱柱分离得到N‑(11‑氨基‑2‑氟‑12‑(喹啉‑3‑基)‑5,6‑二氢嘧啶并[5′,4′:4,5]吡咯并[2,1‑a]异喹啉‑5‑基)‑N‑甲基丙烯酰胺(1.7mg,19%)。ESI‑MS:465.2+[M+H]。[0207] 1HNMR(400MHz,DMSO‑d6)δ8.98(s,1H),8.62(s,1H),8.48(s,1H),8.20(d,J=8.5Hz,1H),8.12(d,J=8.1Hz,1H),7.92(t,J=7.7Hz,1H),7.75(t,J=7.5Hz,1H),7.38(s,1H),7.20(dd,J=9.9,7.4Hz,1H),6.86(s,1H),6.50(dd,J=10.3,2.5Hz,1H),6.25(d,J=16.7Hz,1H),6.09(s,1H),5.80(d,J=10.5Hz,1H),4.60(s,2H),2.83(s,3H)。[0208] 将N‑(11‑氨基‑2‑氟‑12‑(喹啉‑3‑基)‑5,6‑二氢嘧啶并[5′,4′:4,5]吡咯并[2,1‑a]异喹啉‑5‑基)‑N‑甲基丙烯酰胺手性拆分得到(S)‑N‑(11‑氨基‑2‑氟‑12‑(喹啉‑3‑基)‑5,6‑二氢嘧啶并[5′,4′:4,5]吡咯并[2,1‑a]异喹啉‑5‑基)‑N‑甲基丙烯酰胺(39a)和(R)‑N‑(11‑氨基‑2‑氟‑12‑(喹啉‑3‑基)‑5,6‑二氢嘧啶并[5′,4′:4,5]吡咯并[2,1‑a]异喹啉‑5‑基)‑N‑甲基丙烯酰胺(39b)。[0209][0210] 实施例40a~45b可参照实施例39、39a、39b全部或部分合成方法选择相应的原料进行制备:[0211][0212][0213][0214] 上述实施例制备得到的化合物核磁数据如下:[0215][0216][0217][0218] 生物学测试评价[0219] 一、细胞增殖实验[0220] (一)试剂和耗材[0221] 胎牛血清FBS(GBICO,Cat#10099‑141);[0222] 发光法细胞活力检测试剂盒(Promega,Cat#G7572);[0223] 黑色透明平底96孔板,( Cat#3603)。[0224] (二)仪器[0225] SpectraMax多标记微孔板检测仪MD,2104‑0010A;[0226] 二氧化碳培养箱,ThermoScientific3100系列;[0227] 生物安全柜,ThermoScientific,1300系列A2型;[0228] 倒置显微镜,Olympus,CKX41SF;[0229] 西门子冰箱KK25E76TI。[0230] (三)细胞系和培养条件No. 细胞系 细胞培养基 细胞密度1 A431 DMEM+15%FBS 50002 Ba/F3EGFR‑D770‑N771ins_SVD RPMI1640+10%FBS 30003 Ba/F3EGFR‑V769‑D770ins_ASV RPMI1640+10%FBS 3000[0231] (四)实验步骤[0232] 1、细胞培养和接种:[0233] (1)收获处于对数生长期的细胞,并使用血小板计数器对细胞进行计数。通过台盼蓝排除法检测细胞活力,以确保细胞活力在90%以上。[0234] (2)调整细胞浓度以达到所需的最终密度;将90μL细胞悬液添加到96孔板中。[0235] (3)将细胞在96孔板中于37℃,5%CO2和95%湿度下孵育过夜。[0236] 2、T0基准数据:[0237] (1)在装有细胞的T0平板的每个孔中加入10μLPBS。[0238] (2)解冻CTG试剂,并将细胞板平衡至室温30分钟。[0239] (3)向每个孔中添加等体积的CTG溶液。[0240] (4)在定轨摇床上振动5分钟以裂解细胞。[0241] (5)将细胞板在室温下放置20分钟以稳定发光信号。[0242] (6)读取T0荧光信号值。[0243] 3、化合物稀释和添加[0244] (1)根据化合物信息表,将相应体积的DMSO加入相应的化合物粉末中,以制备10mM储备液。[0245] (2)准备1000倍,3.16倍稀释的化合物溶液。[0246] (3)用PBS将1000×稀释的化合物溶液稀释100倍,以制备10倍的化合物溶液,最高浓度为10μM,9种浓度,稀释3.16倍,在接种有96孔板的每个孔中加入10μL药物溶液,接种细胞。每个化合物的浓度设置三个重复孔,DMSO的最终浓度为0.1%。[0247] (4)将细胞置于装有药物的96孔板中,温度为37℃,5%CO2和95%湿度,继续培养72小时,然后进行CTG分析。[0248] 4、荧光信号读取[0249] (1)解冻CTG试剂,并将细胞板平衡至室温30分钟。[0250] (2)向每个孔中添加等体积的CTG溶液。[0251] (3)在定轨摇床上振动5分钟以裂解细胞。[0252] (4)将细胞板在室温放置20分钟以稳定荧光信号。[0253] (5)读取荧光值。[0254] 5、数据处理[0255] 使用GraphPadPrism7.0软件分析数据,并使用非线性S曲线回归拟合数据以获得剂量效应曲线,并据此计算IC50值(单位:nM),具体实验结果见表1:[0256] 细胞存活率(%)=(Lum试验药物‑Lum培养液对照)/(Lum细胞对照‑Lum培养液对照)×100%。[0257] 表1:生物学测试结果[0258][0259] 从具体实施例化合物生物活性数据来看,本发明系列化合物对在细胞水平上对EGFR外显子20插入、缺失或其它突变具有很强的抑制作用,且对EGFRWT具有一定的选择性。[0260] 在本发明提及的所有文献都在本申请中引用作为参考,就如同每一篇文献被单独引用作为参考那样。此外应理解,在阅读了本发明的上述公开内容之后,本领域技术人员可以对本发明作各种改动或修改,这些等价形式同样落于本申请所附权利要求书所限定的范围。
专利地区:上海
专利申请日期:2021-07-07
专利公开日期:2024-09-03
专利公告号:CN116096372B