一种具有肺保护功能的保健品及制备方法和应用

专利名称：一种具有肺保护功能的保健品及制备方法和应用

专利类型：发明专利

专利申请号：CN202211559597.4

专利申请（专利权）人：沈阳药科大学
权利人地址：辽宁省本溪市高新技术产业开发区华佗大街26号

专利发明（设计）人：李宁,陈刚,李巍,周地

专利摘要：本发明属于中药领域，具体涉及一种具有肺保护功能的保健品及制备和应用。一种具有肺保护功能的保健品，所述保健品，按重量份，由以下原料药制成：黄精8‑15份，玉竹10‑17份，甘草10‑15份。本发明还提供了任一所述的一种具有肺保护功能的保健品(中药组合物)、任一所述的制备方法制得的具有肺保护功能的保健品，在制备预防或肺保护的药物中的应用。本发明以“治未病”的中医理论为基础，全面分析中药治疗肺部疾病的临床应用特点，选择入肺经的扶正固本中药为研究对象，利用构建的体内、外肺癌化学预防作用评价体系筛选黄精、玉竹和甘草中药组合物的活性。

主权利要求：
1.中药组合物在制备具有肺保护功能的药物中的应用，其特征在于，所述肺保护功能为对纳米二氧化硅或NNK所致的肺上皮细胞损伤的保护作用，其中，所述中药组合物，按重量份，由以下原料药制成：黄精8‑15份，玉竹10‑17份，甘草10‑15份。
2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述中药组合物，按重量份，由以下原料药制成：黄精9‑11份，玉竹11‑13份，甘草11‑13份。
3.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述中药组合物，按重量份，由以下原料药制成：黄精9份，玉竹10份，甘草11份；
或黄精10份，玉竹12份，甘草12份；
或黄精11份，玉竹12份，甘草13份。
4.权利要求1所述的应用，其特征在于，所述中药组合物按下述方法制得：按照选定的重量份数称取黄精，玉竹和甘草，混合后按常规提取方法提取或分别按常规提取方法提取后混合，即得。
5.根据权利要求4所述的应用，其特征在于，所述的常规提取方法包括超声提取法、煎煮法、加热回流提取法、渗漉提取法和微波提取法中的一种或几种，其中，所述提取溶剂为水或体积百分数为70‑95%的甲醇或乙醇溶液；提取次数为3‑5次；每次提取的时间为60‑120min；提取溶剂与原料药的体积与重量比值为2‑5L：1kg。
6.根据权利要求4所述的应用，其特征在于，所述方法，包括如下步骤：(1)按照选定的重量份数称取黄精、玉竹和甘草，加水，煎煮60‑80min，过滤，得滤液和药渣；
(2)取步骤(1)得到的药渣，加水，煎煮60‑80min，重复操作2次，将得到的滤液合并，得药液。
7.根据权利要求6所述的应用，其特征在于，所述步骤(1)中，在煎煮之前还包括将原料药在水中浸泡的步骤，浸泡的时间为60‑120min。
8.根据权利要求6所述的应用，其特征在于，所述步骤(2)中，制得水煎液之后还包括对水煎液进行浓缩得浸膏并将浸膏经干燥得固定药物粉末的步骤。 说明书 : 一种具有肺保护功能的保健品及制备方法和应用技术领域[0001] 本发明属于中药领域，具体涉及一种具有肺保护功能的保健品及制备和应用。背景技术[0002] 肺部相关疾病包含咳嗽、急性肺损伤、慢性支气管炎、肺结核、慢性阻塞性肺疾病和哮喘等在内的多种疾病及相关炎症。从中医角度上，肺主气，司呼吸，主行水，朝百脉，主治节，具有宣发和肃降作用。肺系疾病多以气机升降失常的证候为主，常见有肺气亏虚、阴津亏耗、寒邪犯肺、邪热乘肺和痰浊阻肺等。当肺失宣肃，则易咳嗽、喘息，继而通调水道失职，引起水肿、小便不利；肺不主气，则短气、自汗、易感冒等；肺气失调，不朝百脉，则心血运行不利等。因此宣降肺气，生津补肺，补虚培元，扶正祛邪是中医临床中肺系疾病的主要治疗原则。发明内容[0003] 本发明的目的在于提供一种具有肺保护功能的保健品及其制备方法和用途。[0004] 一种具有肺保护功能的保健品，所述保健品，按重量份，由以下原料药制成：黄精8‑15份，玉竹10‑17份，甘草10‑15份。[0005] 优选地，所述具有肺保护功能的保健品，按重量份，由以下原料药制成：黄精9‑11份，玉竹11‑13份，甘草11‑13份。[0006] 进一步优选地，所述具有肺保护功能的保健品，按重量份，由以下原料药制成：黄精9份，玉竹10份，甘草11份；[0007] 进一步优选地，所述具有肺保护功能的保健品，按重量份，由以下原料药制成：黄精10份，玉竹12份，甘草12份；[0008] 进一步优选地，所述具有肺保护功能的保健品，按重量份，由以下原料药制成：黄精11份，玉竹12份，甘草13份。[0009] 一种具有肺保护功能的保健品的制备方法，按照选定的重量份数称取黄精，玉竹和甘草，混合后按常规提取方法提取或分别按常规提取方法提取后混合，即得。[0010] 优选地，所述的常规提取方法包括超声提取法、煎煮法、加热回流提取法、渗漉提取法和微波提取法中的一种或几种，其中，[0011] 所述提取溶剂为水或体积百分数为70‑95％的甲醇或乙醇溶液；提取次数为3‑5次；每次提取的时间为60‑120min；提取溶剂与原料药的体积与重量比值为2‑5L：1kg。[0012] 本发明一个优选的技术方案为：[0013] 一种具有肺保护功能的保健品的制备方法，包括如下步骤：[0014] (1)按照选定的重量份数称取黄精、玉竹和甘草，加水，煎煮60‑80min，过滤，得滤液和药渣；[0015] (2)取步骤(1)得到的药渣，加水，煎煮60‑80min，重复操作2次，将得到的滤液合并，得药液。[0016] 优选地，所述步骤(1)中，在煎煮之前还包括将原料药在水中浸泡的步骤，浸泡的时间为60‑120min。[0017] 优选地，所述步骤(2)中，制得水煎液之后还包括对水煎液进行浓缩得浸膏并将浸膏经干燥得固定药物粉末的步骤。[0018] 本发明进一步提供上述中药组合物，或上述制备方法制得的中药组合物在制备预防或肺保护的药物中的应用。[0019] 进一步地，所述肺部相关疾病为咳嗽、急性肺损伤、慢性支气管炎、肺结核、慢性阻塞性肺疾病和哮喘中的至少一种。[0020] 本发明的有益效果为：本发明还提供了任一所述的一种具有肺保护功能的保健品(中药组合物)、任一所述的制备方法制得的具有肺保护功能的保健品，在制备预防或肺保护的药物中的应用，优选地，所述肺保护所涉及的肺部疾病包括但不限于咳嗽、急性肺损伤、慢性支气管炎、肺结核、慢性阻塞性肺疾病和哮喘等。本发明以“治未病”的中医理论为基础，全面分析中药治疗肺部疾病的临床应用特点，选择入肺经的扶正固本中药为研究对象，利用构建的体内、外肺癌化学预防作用评价体系筛选黄精、玉竹和甘草中药组合物的活性。具体实施方式[0021] 下述非限制性实施例可以使本领域的普通技术人员更全面地理解本发明，但不以任何方式限制本发明。[0022] 下述实施例中所述试验方法，如无特殊说明，均为常规方法；所述试剂和材料，如无特殊说明，均可从商业途径获得。[0023] 实施例中未注明具体实验步骤或条件者，按照本领域内的文献所描述的常规实验步骤的操作或条件即可进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市购获得的常规试剂产品。[0024] 所有药材质检合格，符合《中华人民共和国药典》标准。[0025] 实施例1中药组合物[0026] 组成：黄精30g，玉竹36g，甘草36g。[0027] 制法：取黄精、玉竹和甘草混合，加水煎煮3次，第一次加水200mL，浸泡60min，然后煎煮80min，第二次加水150mL，煎煮60min，第三次加水100mL，煎煮60min。三次所得的煎煮液均通过100目筛，合并滤液，即得。[0028] 实施例2中药组合物[0029] 组成：黄精27g，玉竹33g，甘草33g。[0030] 制法：取黄精、玉竹和甘草混合，加水煎煮3次，第一次加水180mL，浸泡80min，然后煎煮90min，第二次加水150mL，煎煮60min，第三次加水100mL，煎煮60min。三次所得的煎煮液均通过100目筛，合并滤液，即得。[0031] 实施例3中药组合物[0032] 组成：黄精30g，玉竹36g，甘草36g。[0033] 制法：取黄精、玉竹和甘草混合，加水超声提取3次，第一次加水200mL，浸泡60min，然后超声80min，第二次加水150mL，超声60min，第三次加水100mL，超声60min。三次所得的提取液均通过100目筛，合并滤液，即得。[0034] 实施例4中药组合物[0035] 组成：黄精33g，玉竹39g，甘草39g。[0036] 制法：取黄精、玉竹和甘草，分别加水超声提取3次，第一次分别加水50mL，浸泡60min，然后超声80min，第二次分别加水50mL，超声60min，第三次分别加水50mL，超声60min。三次所得的所有提取液均通过100目筛，合并滤液，即得。[0037] 实施例5中药组合物[0038] 组成：黄精30g，玉竹36g，甘草36g。[0039] 制法：取黄精、玉竹和甘草混合，加水煎煮提取4次，第一次加水200mL，浸泡60min，然后超声80min，第二次加水150mL，超声60min，第三次加水100mL，超声60min，第四次加水100mL，超声60min。四次所得的提取液均通过100目筛，合并滤液，即得。[0040] 实施例6中药组合物[0041] 组成：黄精30g，玉竹36g，甘草36g。[0042] 制法：取黄精、玉竹和甘草，分别加水煎煮提取3次，第一次分别加水200mL，浸泡60min，然后超声80min，第二次分别加水150mL，超声60min，第三次分别加水100mL，超声60min。三次所得的提取液均通过100目筛，合并滤液，即得。[0043] 实施例1本发明实施例的中药组合物对纳米二氧化硅和NNK所致的细胞损伤的保护作用[0044] 1、实验细胞[0045] 小鼠正常肺泡Ⅱ型上皮MLE‑12细胞(购于上海澳音生物科技有限公司)。[0046] 2、实验试剂[0047][0048] 3、实验仪器[0049][0050] 4、细胞培养[0051] 将MLE‑12细胞从液氮中取出，于37℃水浴锅中快速复苏，在DMEM/F12培养基(内含510％胎牛血清和1％双抗)中培育，浓度：2.5×10cells/mL，温度：37℃，CO2含量：5％。待第三天贴壁细胞约占培养瓶底面积的80～90％时，用胰酶消化贴壁细胞，传代至另一培养瓶中。[0052] 5、纳米二氧化硅颗粒混悬液的制备[0053] 实验过程中nmSiO2颗粒混悬液现用现配。称取适量nmSiO2颗粒，用无血清的DMEM/F12培养基配制浓度为20μg/mL的nmSiO2硅储备液(体外实验)或5％的CMC‑Na溶液配制浓度为7mg/mLnmSiO2储备液(体内实验)，分别涡旋震荡超声30min混匀待用。[0054] 6、MTT细胞活力检测[0055] (1)细胞存活率检测[0056] ①接种细胞：将对数生长期生长状态良好的MLE‑12细胞，用0.25％的胰蛋白酶消4化，培养液吹打分散成单个细胞悬液，经计数后制成密度为2.5×10 的细胞混悬液，接种到96孔板中，每孔100μL，置于5％CO2的37℃恒温培养箱中贴壁培养，过夜。[0057] ②药物处理：待第二日吸去上清后，加入3个不同浓度梯度的待测样品溶液(10,50,100mg/mL)，每组平行设置3个复孔，5％CO2的37℃恒温培养箱培育24h，显微镜下观察细胞状态。[0058] ③MTT检测细胞活力：于96孔板中加入MTT溶液(2mg/mL)，每孔50μL，5％CO2的37℃恒温培养箱培育5h。弃去上清液后，加入DMSO，每孔100μL，置于摇床上震荡5min，使紫色甲瓒结晶溶解。最后使用酶标仪于490nm波长下进行吸光度测定。实验重复3次。[0059] ④统计学分析：使用GraphPadPrism8.2.1软件统计数据结果，并根据以下公式计算细胞活力。[0060][0061] (2)nmSiO2诱导细胞损伤实验[0062] 同上述操作。模型组加入配置好的20μg/mLnmSiO2混悬液，给药组加入20μg/mLnmSiO2混悬液与不同浓度的待测样品溶液(10,50,100mg/mL)。[0063] (3)NNK诱导细胞损伤实验[0064] 同上述操作。NNK模型组加入配置好的0.3mg/mL的NNK溶液，给药组加入0.3mg/mL的NNK和3个不同浓度梯度的待测样品(10,50,100mg/mL)。[0065] 7、实验结果[0066] 应用nmSiO2诱导的MLE‑12细胞损伤模型评价了中药组合物的肺上皮细胞保护活性。测试结果表明在给药浓度下，组合物可显著逆转nmSiO2诱导的细胞损伤，且具有一定的浓度依赖性，其活性数据见Table1所示。[0067] Table1中药组合物对MLE‑12细胞存活率(％)的影响(Mean±SEM)[0068][0069] 应用NNK诱导的MLE‑12细胞损伤模型评价了中药组合物的肺上皮细胞保护活性。测试结果表明在给药浓度下，组合物可显著逆转NNK诱导的细胞损伤，且具有一定的浓度依赖性，其活性数据见Table2所示。[0070] Table2中药组合物对MLE‑12细胞存活率(％)的影响(Mean±SEM)[0071][0072] 实施例2本发明实施例的中药组合物对纳米二氧化硅和NNK所致的细胞损伤的保护作用[0073] 1、实验细胞、试剂、仪器和方法同实施例1所述[0074] 2、实验结果[0075] 应用nmSiO2诱导的MLE‑12细胞损伤模型评价了中药组合物的肺上皮细胞保护活性。测试结果表明在给药浓度下，组合物可显著逆转nmSiO2诱导的细胞损伤，且具有一定的浓度依赖性，其活性数据见Table3所示。[0076] Table3中药组合物对MLE‑12细胞存活率(％)的影响(Mean±SEM)[0077][0078] 应用NNK诱导的MLE‑12细胞损伤模型评价了中药组合物的肺上皮细胞保护活性。测试结果表明在给药浓度下，组合物可显著逆转NNK诱导的细胞损伤，且具有一定的浓度依赖性，其活性数据见Table4所示。[0079] Table4中药组合物对MLE‑12细胞存活率(％)的影响(Mean±SEM)[0080][0081][0082] 实施例3本发明实施例的中药组合物对纳米二氧化硅和NNK所致的细胞损伤的保护作用[0083] 1、实验细胞、试剂、仪器和方法同实施例1所述[0084] 2、实验结果[0085] 应用nmSiO2诱导的MLE‑12细胞损伤模型评价了中药组合物的肺上皮细胞保护活性。测试结果表明在给药浓度下，组合物可显著逆转nmSiO2诱导的细胞损伤，且具有一定的浓度依赖性，其活性数据见Table5所示。[0086] Table5中药组合物对MLE‑12细胞存活率(％)的影响(Mean±SEM)[0087][0088] 应用NNK诱导的MLE‑12细胞损伤模型评价了中药组合物的肺上皮细胞保护活性。测试结果表明在给药浓度下，组合物可显著逆转NNK诱导的细胞损伤，且具有一定的浓度依赖性，其活性数据见Table6所示。[0089] Table6中药组合物对MLE‑12细胞存活率(％)的影响(Mean±SEM)[0090][0091] 实施例4本发明实施例的中药组合物对纳米二氧化硅和NNK所致的细胞损伤的保护作用[0092] 1、实验细胞、试剂、仪器和方法同实施例1所述[0093] 2、实验结果[0094] 应用nmSiO2诱导的MLE‑12细胞损伤模型评价了中药组合物的肺上皮细胞保护活性。测试结果表明在给药浓度下，组合物可显著逆转nmSiO2诱导的细胞损伤，且具有一定的浓度依赖性，其活性数据见Table7所示。[0095] Table7中药组合物对MLE‑12细胞存活率(％)的影响(Mean±SEM)[0096][0097] 应用NNK诱导的MLE‑12细胞损伤模型评价了中药组合物的肺上皮细胞保护活性。测试结果表明在给药浓度下，组合物可显著逆转NNK诱导的细胞损伤，且具有一定的浓度依赖性，其活性数据见Table8所示。[0098] Table8中药组合物对MLE‑12细胞存活率(％)的影响(Mean±SEM)[0099][0100] 实施例5本发明实施例的中药组合物对纳米二氧化硅和NNK所致的细胞损伤的保护作用[0101] 1、实验细胞、试剂、仪器和方法同实施例1所述[0102] 2、实验结果[0103] 应用nmSiO2诱导的MLE‑12细胞损伤模型评价了中药组合物的肺上皮细胞保护活性。测试结果表明在给药浓度下，组合物可显著逆转nmSiO2诱导的细胞损伤，且具有一定的浓度依赖性，其活性数据见Table9所示。[0104] Table9中药组合物对MLE‑12细胞存活率(％)的影响(Mean±SEM)[0105][0106] 应用NNK诱导的MLE‑12细胞损伤模型评价了中药组合物的肺上皮细胞保护活性。测试结果表明在给药浓度下，组合物可显著逆转NNK诱导的细胞损伤，且具有一定的浓度依赖性，其活性数据见Table10所示。[0107] Table10中药组合物对MLE‑12细胞存活率(％)的影响(Mean±SEM)[0108][0109] 实施例6本发明实施例的中药组合物对纳米二氧化硅和NNK所致的细胞损伤的保护作用[0110] 1、实验细胞、试剂、仪器和方法同实施例1所述[0111] 2、实验结果[0112] 应用nmSiO2诱导的MLE‑12细胞损伤模型评价了中药组合物的肺上皮细胞保护活性。测试结果表明在给药浓度下，组合物可显著逆转nmSiO2诱导的细胞损伤，且具有一定的浓度依赖性，其活性数据见Table11所示。[0113] Table11中药组合物对MLE‑12细胞存活率(％)的影响(Mean±SEM)[0114][0115] 应用NNK诱导的MLE‑12细胞损伤模型评价了中药组合物的肺上皮细胞保护活性。测试结果表明在给药浓度下，组合物可显著逆转NNK诱导的细胞损伤，且具有一定的浓度依赖性，其活性数据见Table12所示。[0116] Table12中药组合物对MLE‑12细胞存活率(％)的影响(Mean±SEM)[0117]

专利地区：辽宁

专利申请日期：2022-12-06

专利公开日期：2024-11-05

专利公告号：CN116139220B